| 乙型肝炎表面抗原“免疫逃避”突变体在哺乳动物细胞中的表达 |
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| 引用本文： | Harr.,T 任红.乙型肝炎表面抗原“免疫逃避”突变体在哺乳动物细胞中的表达[J].中华肝脏病杂志,1994,2(3):134-137. |
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| 作者姓名： | Harr. T 任红 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学病毒性肝炎研究所 |
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| 摘 要： | 利用乙型肝炎病毒ＤＮＡ开放框架上的ＢａｍＨＩ和ＨｐａＩ位点，酶切消化质粒载体ＰＥｃｏｂ６（含双拷贝ＨＢＶＤＮＡ），得到约９００ｂｐ的ＨＢＶ－Ｓ基因片断。将其插入到噬菌粒载体ＰＢｌｕｅｓｃｒｉｐｔｓｋ＋的ＳｍａＩ位点上。然后通过体外寡核苷酸介导的人工定点突变获得一系列（共１２种）Ｓ基因“免疫逃避”突变型。再通过ＥＢ病毒真核表达载体ｐＭＥＰ４上的ＢａｍＨＩ和Ｋｐｎｌ位点将噬菌粒ｐＢｌｕｅｓｃｒｉｐｓｋ＋上的Ｓ基因突变型片断定向克隆到ＰＭＥＰ４上，从而构建了含乙肝Ｓ基因突变型的重组质粒ｐＭＥＰ４ＨＢＳＭ。用其转染人肝癌传代细胞系ＨｅｐＧ２，经潮霉素选择，三周后获得抗性细胞克隆。经用抗ＨＢｓ单克隆抗体（含针对ＨＢｓＡｇ“ａ”抗原决定簇）检测除含变异体１４５（即１４５位上甘氨酸为精氨酸替代）外其余抗变异体ＨＢｓＡｇ均为阳性。经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ证实变异体１４５，在分子量约为２３ＫＤ处有一特异ＨＢｓＡｇ蛋白带。
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| 关 键 词： | 乙型肝炎表面抗原突变体，真核表达 |
EXPRESSI0N OF 12 VARI0US TYPES 0F ANTIBODY ESCAPE MUTANTS 0F
HEPATITIS B VIRUSSURFACE ANTIGEN IN MAMMALIAN CELL BY USING AN
EPSTEIN-BARR BASED VECT0R |
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| RenHong,Tim Harrison. Institute for
Viral Hepatits of Chongqing Medical University,Chogqing,..EXPRESSI0N OF 12 VARI0US TYPES 0F ANTIBODY ESCAPE MUTANTS 0F
HEPATITIS B VIRUSSURFACE ANTIGEN IN MAMMALIAN CELL BY USING AN
EPSTEIN-BARR BASED VECT0R[J].Chinese Journal of Hepatology,1994,2(3):134-137. |
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| Authors: | RenHong Tim Harrison Institute for
Viral Hepatits of Chongqing Medical University Chogqing |
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| Affiliation: | RenHong,Tim Harrison. Institute for
Viral Hepatits of Chongqing Medical University,Chogqing,630010. |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | HBsAg mutant Eukaryotic expression |
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