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萘和苯酚降解菌中儿茶酚2,3-双加氧酶基因的类似性分析及杂种酶构建
引用本文:赵化冰,杨健,任何山,李永君,蔡宝立.萘和苯酚降解菌中儿茶酚2,3-双加氧酶基因的类似性分析及杂种酶构建[J].南开大学学报,2008,41(4).
作者姓名:赵化冰  杨健  任何山  李永君  蔡宝立
作者单位:南开大学微生物学系 生物活性材料教育部重点实验室,天津300071
摘    要:从7个萘降解菌株和5个苯酚降解菌株中经PcR扩增得到12个儿茶酚2,3-双加氧酶(C23O)基因,大小均为924 bp.根据DNA序列的类似性,可将这12个C23O基因聚类为3组,此结果与分离菌株的样本来源基本一致.这12个基因均编码307个氨基酸残基的儿茶酚2,3-双加氧酶,序列中都含有9个严格保守的氨基酸残基(Gly30、His153、Leu172、His199、His214、His246、Tyr255、Pro259、Glu265),均属于外切双加氧酶的I.2.A亚家族.通过盒式PCR,用各种萘和苯酚降解菌的C23O基因中心区替换恶臭假单胞菌ND6菌株pND6-1质粒中nahH基因的中心区,得到5个杂种C23O基因,这些基因在pET-E.coli BL21(DE3)系统中表达以后,均能检测到C23O活性,其中中心区来自假单胞菌ND24菌株C23O基因的杂种酶C23O-ND24,其比活力高于对照恶臭假单胞菌ND6菌株的野生型C23O.

关 键 词:萘降解菌  苯酚降解菌  儿茶酚2  3-双加氧酶基因  类似性分析  杂种酶

Identical Analysis of Catechol 2,3-Dioxygenase Genes Isolated from Naphthalene and Phenol-degrading Strains and Hybrid Enzyme Construction
Zhao Huabing,Yang Jian,Ren Heshan,Li Yongjun,Cai Baoli.Identical Analysis of Catechol 2,3-Dioxygenase Genes Isolated from Naphthalene and Phenol-degrading Strains and Hybrid Enzyme Construction[J].Acta Scientiarum Naturalium University Nankaiensis,2008,41(4).
Authors:Zhao Huabing  Yang Jian  Ren Heshan  Li Yongjun  Cai Baoli
Abstract:
Keywords:
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