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狂犬病毒aG株糖蛋白在CHO细胞中的表达
引用本文:钱源,孙明波,张鸣,杨卉娟,蒋燕军,姜述德,廖国阳,李卫东.狂犬病毒aG株糖蛋白在CHO细胞中的表达[J].粉末涂料与涂装,2005,18(3):212-214.
作者姓名:钱源  孙明波  张鸣  杨卉娟  蒋燕军  姜述德  廖国阳  李卫东
作者单位:中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所 昆明650118 (钱源,孙明波,张鸣,杨卉娟,蒋燕军,姜述德,廖国阳),中国医学科学院中国协和医科大学医学生物学研究所 昆明650118(李卫东)
基金项目:2003年度云南省科技厅创新人才引培项目(编号2003PY07).
摘    要:目的克隆狂犬病毒aG株糖蛋白(Glycoprotein)基因,构建重组真核表达载体,在CHO细胞中表达aG株糖蛋白。方法采用RTPCR,从狂犬病毒aG株基因组RNA中扩增GP基因,并将该基因克隆至真核表达载体pCIdhfr上,以脂质体介导法转染CHOdhfr-细胞。用MTX筛选的抗性克隆经ELISA、免疫荧光及Westernblot检测GP蛋白的表达。结果克隆到狂犬病毒aG株糖蛋白全长基因,并在CHO细胞中进行表达。结论成功地在CHO细胞中表达了狂犬病毒aG株的糖蛋白,为进一步开发狂犬病毒基因工程疫苗打下基础。

关 键 词:狂犬病毒  CHO细胞  表达  糖蛋白
修稿时间:2004年11月19

Expression of Glycoprotein of Rabies Virus aG Strain in CHO Cells
QIAN Yuan,SUN Ming-bo,ZHANG Ming,et al.Expression of Glycoprotein of Rabies Virus aG Strain in CHO Cells[J].Chinese Journal of Biologicals,2005,18(3):212-214.
Authors:QIAN Yuan  SUN Ming-bo  ZHANG Ming  
Abstract:Objective To clone the gene encoding glycoprotein (GP) of rabies virus aG strain,construct a eukaryotic expression vector and express the GP in CHO cells.Methods The gene encoding GP was amplified from the genome RNA of rabies virus aG strain,cloned into eukaryotic expression vector pCI-dhfr and transfected to CHO-dhfr cells in mediation of liposome.The transfectants were selected with methotrexate (MTX),and the expressed GP protein was analyzed by ELISA,immunofluorescence method and Western blot.Results The full-length of GP gene of rabies virus aG strain was cloned and expressed in CHO cells.Conclusion The successful expression of GP of rabies virus aG strain laid a foundation of further development of recombinant rabies vaccine.
Keywords:Rabies virus  CHO cell  Expression  Glycoprotein
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