| 重组羧肽酶B及其包涵体溶解性的研究 |
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| 引用本文： | 安宇,李节,李素霞,赵健,范立强,袁勤生.重组羧肽酶B及其包涵体溶解性的研究[J].食品与药品,2007,9(10A):1-5. |
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| 作者姓名： | 安宇 李节 李素霞 赵健 范立强 袁勤生 |
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| 作者单位： | 华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室,上海200237 |
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| 摘 要： | 目的 构建重组羧肽酶B（rCPB）的表达质粒和表达菌株，表达羧肽酶B（CPB），并对表达CPB包涵体的溶解性进行研究。方法构建CPB重组质粒pET-21a—CPB，将其导入表达菌株BL21（DE3）中，分别在25℃和37℃进行诱导表达；所得包涵体分别用不同浓度尿素添加不同还原剂溶解，以溶液中的蛋白质浓度判定其溶解性，利用非还原SDS—PAGE分析其溶解性提高的原因。结果诱导后生长温度不同对rCPB包涵体的纯度及后期处理均有影响；rCPB包涵体在10mol／L尿素溶液中的溶解度比在8mol／L尿素溶液中提高2-3倍；添加0．75％β-巯基乙醇能显著改善rCPB包涵体的溶解效果。经非还原SDS—PAGE分析，添加β-巯基乙醇后，溶解rCPB聚体的含量减少。结论成功地表达了rCPB，并通过实验提高了rCPB包涵体的溶解度。
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| 关 键 词： | 重组羧肽酶B 包涵体 变性 还原变性 |
| 文章编号： | 1672-979X（2007）10-0001-05 |
| 修稿时间： | 2007-06-14 |
Research on Recombinant Carboxypeptidase B and Solubility of Its Inclusion Body |
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| AN Yu, LI Jie, LI Su-xia, ZHAO Jian, FAN Li-qiang, YUAN Qin-sheng.Research on Recombinant Carboxypeptidase B and Solubility of Its Inclusion Body[J].Food and Drug,2007,9(10A):1-5. |
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| Authors: | AN Yu LI Jie LI Su-xia ZHAO Jian FAN Li-qiang YUAN Qin-sheng |
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| Affiliation: | State Key Laboratory of Bioreactor Engineering, East China University of Science and Technology, Shanghai 200237, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | recombinant carboxypeptidase B inclusion body denaturation reducing denaturation |
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