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反义骨调素寡核苷酸对肾小管上皮细胞骨调素mRNA表达及其胶原凝胶黏附能力的影响
引用本文:刘晓波,余学清,李晓艳,祝胜郎,董秀清.反义骨调素寡核苷酸对肾小管上皮细胞骨调素mRNA表达及其胶原凝胶黏附能力的影响[J].中山大学学报(医学科学版),2003,24(5):439-443.
作者姓名:刘晓波  余学清  李晓艳  祝胜郎  董秀清
作者单位:中山大学附属第一医院肾内科教育部及广东省肾脏病重点实验室 广东广州510080 (刘晓波,余学清,李晓艳,祝胜郎),中山大学附属第一医院肾内科教育部及广东省肾脏病重点实验室 广东广州510080(董秀清)
基金项目:国家自然科学基金资助项目(39970704),广东省自然科学基金资助项目(980058,010763)
摘    要:【目的】观察反义骨调素(OPN)寡核苷酸(AS-ODN)对大鼠肾小管上皮细胞(NRK52E)骨调素mRNA表达及黏附能力的影响;比较AS-ODN的游离形式和经阳离子脂质体(DOTAP)包裹形式的反义抑制效果。【方法】用荧光显微镜观察荧光素标记的AS-ODN在细胞中的分布;将寡核苷酸处理NRK52E细胞48h,用TRIzol试剂提取细胞总RNA;用RNA斑点杂交和RT-PCR检测OPNmRNA的表达;将ODN/DOTAP复合物处理的细胞置于胶原凝胶表面,计算细胞的黏附率。【结果】AS-ODN能转移进入胞核中;AS-ODN处理的细胞OPNmRNA表达水平均较低(P<0.05),而顺义或错义寡核苷酸处理的细胞OPNmRNA水平较高,即使30μmol/L浓度也无抑制作用;游离AS-ODN最低抑制浓度为3.75μmol/L,而AS-ODN浓度为0.5μmol/L的AS-ODN/DOTAP复合物具有良好抑制作用;AS-ODN处理的细胞黏附率降低,而顺义或错义寡核苷酸处理的细胞黏附能力较强。【结论】反义骨调素寡核苷酸能特异地抑制大鼠肾小管上皮细胞OPNmRNA表达和黏附胶原凝胶能力;阳离子脂质体能促进AS-ODN的反义抑制作用。

关 键 词:骨调素  寡核苷酸类  反义  肾小管  上皮细胞
文章编号:1672-3554(2003)05-0439-05
修稿时间:2003年1月13日

Inhibitory Effects of Osteopontin Antisense Oligodeoxynucleotide on Osteopontin mRNA Expression and Adhension to Collagen Gel of Rat Renal Epithelial Cells
LIU Xiao bo,YU Xue qing,LI Xiao yan,ZHU Sheng lang,DONG Xiu qing.Inhibitory Effects of Osteopontin Antisense Oligodeoxynucleotide on Osteopontin mRNA Expression and Adhension to Collagen Gel of Rat Renal Epithelial Cells[J].Journal of Sun Yatsen University(Medical Sciences),2003,24(5):439-443.
Authors:LIU Xiao bo  YU Xue qing  LI Xiao yan  ZHU Sheng lang  DONG Xiu qing
Abstract:
Keywords:osteopontin  oligodeoxynucleotide  antisense  kidney tubules  epithelial cell
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