| 何首乌ISSR—PCR反应体系的建立与优化 |
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| 引用本文： | 赵振华,严萍,焦旭雯,赵树进.何首乌ISSR—PCR反应体系的建立与优化[J].时珍国医国药,2008,19(3):567-569. |
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| 作者姓名： | 赵振华 严萍 焦旭雯 赵树进 |
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| 作者单位： | 1. 华南理工大学生物科学与工程学院,广东,广州,510640
2. 中国人民解放军广州军区广州总医院,广东,广州,510010 |
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| 基金项目： | 广东省社会发展领域科技计划项目(No.63108) |
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| 摘 要： | 目的 建立和优化ISSR-PCR反应体系.方法 通过单因素实验研究ISSR反应体系中主要成分(模板、Taq DNA聚合酶、Mg2 、引物、dNTPs)以及退火温度对扩增结果的影响.结果 建立了适合何首乌ISSR分析的反应体系和扩增程序,即在25μl反应体系中,内含1×Taq酶配套缓冲液、100ng模板、1.5 U Taq DNA聚合酶、1.5 mmol/L Mg2 、0.6μmol/L引物、0.2 mmol/L dNTPs.扩增程序为94℃预变性5 min;然后是94℃变性45s,(据不同引物的退火温度)复性1 min,72℃延伸1.5 min,共35个循环;72℃延伸7 min,4℃保存.结论 这一优化体系的建立为今后利用ISSR标记技术进行何首乌鉴定及种质资源遗传多样性分析提供了一个标准化程序.
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| 关 键 词： | 何首乌 简单重复序列区间扩增多太性 反应体系 建立与优化 |
| 文章编号： | 1008-0805(2008)03-0567-02 |
| 修稿时间： | 2007年6月29日 |
Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Polygonum multiflorum Thunb. |
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| ZHAO Zhen-hua,YAN Ping,JIAO Xu-wen,ZHAO Shu-jin.Establishment and Optimization of ISSR-PCR Reaction System for Polygonum multiflorum Thunb.[J].Lishizhen Medicine and Materia Medica Research,2008,19(3):567-569. |
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| Authors: | ZHAO Zhen-hua YAN Ping JIAO Xu-wen ZHAO Shu-jin |
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