电针诱导BMSCs分化为血管生长因子的机制研究

摘要：目的：探讨电针诱导 BMSCs分化为血管生长因子的机制研究。方法：采用全骨髓贴壁法分离、传代大鼠BMSCs；流式细胞仪对BMSCs表面抗原（CD29）进行鉴定。将SD大鼠随机分为5组，分别为假手术组、模型组、电针组、BMSCs组、电针+BMSCs组，制备MIRI模型。假手术组只结扎不穿线；模型组、电针组采用心肌内直接注射生理盐水的方法；BMSCs组、电针+BMSCs组将BMSCs移植到梗死边缘区；分别在移植后3d、7d、14d三个时间点电镜下观察心肌超微细结构改变，免疫组化法检测心肌组织VEGF、TGF-β1蛋白含量的变化；Western blot 法检测Ang-1、bFGF蛋白含量。结果：流式细胞仪检测结果显示CD29阳性率高于90%，提示细胞纯度较高，均一性较好；电镜显示电针＋BMSCs组心肌线粒体肿胀，内嵴部清晰，溶解现象减轻；免疫组化染色后VEGF、TGF-β1呈“棕黄色”即阳性表达，再灌注后，随着时间的延长，各组各个时相点VEGF蛋白含量明显高于模型组（P＜0.05），电针＋BMSCs组治疗效果明显优于其他治疗组（P＜0.05）；随着时间延长，各治疗组TGF-β1蛋白呈现先高后低的趋势；与再灌注3d比较，7d、14d时TGF-β1蛋白水平明显降低（P<0.05）；与再灌注7d比较，14d时电针＋BMSCs组TGF-β1蛋白水平明显降低（P<0.05）。Western blot 检测结果显示随着时间延长，各治疗组Ang-1、bFGF蛋白呈现逐渐升高的趋势；与再灌注3d、7d比较，14d时Ang-1蛋白水平显著升高（P<0.05），其中以电针＋BMSCs组疗效更为显著（P<0.05）。结论：电针能够诱导BMSCs分化为血管生长因子，其机制可能与电针治疗促进BMSCs在心肌内生长增殖，明显改善MIRI心肌组织超微细结构损伤，上调VEGF、Ang-1、bFGF蛋白水平，动态调控TGF-β1水平有关。