来源于生孢噬纤维菌的新型β-葡萄糖苷酶SmBgl3A的性质研究

通过表达水平分析比较，从生孢噬纤维菌Sporocytophaga sp. CX11基因组中筛选出在菌株降解纤维二糖过程中起关键作用的β-葡萄糖苷酶基因SmBgl3A。该基因含有2 283 bp碱基对，编码760个氨基酸，其编码蛋白质与来源于Bacteroides ovatus的β-葡萄糖苷酶BoGH3B同源性为46.76 %。将该基因在大肠杆菌中进行异源表达，粗酶液经Ni-NTA亲和层析一步纯化得到电泳级纯度的酶蛋白SmBgl3A，重组蛋白质相对分子质量与理论值（81.2×10⁴）一致。酶学性质表征结果表明，SmBgl3A最适温度和pH分别为35 ℃和6.5；pH在5.0~7.0、温度在40 ℃以下时，稳定性较好，同时有着较好的NaCl耐受性。SmBgl3A的最适底物为pNPG，以pNPG为底物时的比活力为14.74 U/mg；K_m为10.88 mmol/L，k_cat为46.72 s< sup > -1。SmBgl3A作为一种新型的、酶学性质优良的β-葡萄糖苷酶，进一步扩展了β-葡萄糖苷酶的种类，为该酶在纤维素降解、食品工业等领域的应用奠定基础。