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腺病毒5型E1A基因转染前后乳腺癌细胞相关指标水平的变化
引用本文:杨新宇,宫路路,刘志毅,房学东.腺病毒5型E1A基因转染前后乳腺癌细胞相关指标水平的变化[J].中国实验诊断学,2007,11(7):860-863.
作者姓名:杨新宇  宫路路  刘志毅  房学东
作者单位:1. 吉林大学第二医院普通外科,吉林,长春,130033
2. 吉林大学第三医院,泌尿外科
摘    要:目的 本研究旨在探讨E1A基因对乳腺癌细胞凋亡的影响,为乳腺癌E1A基因治疗的可行性提供理论和实验依据。方法 ①构建E1A基因真核表达质粒pEGFP-E1A:通过酶切反应获得E1A基因,琼脂糖凝胶回收后,连接入pEGFP-C1载体EcoR Ⅰ和BamHⅠ位点中。②E1A基因转染乳腺癌细胞系:脂质体介导将E1A基因转入乳腺癌细胞系SK-BR-3细胞株,经筛选获得稳定表达E1A基因的转染试验组细胞。③RT-PCR检测E1A基因的mRNA表达、west—ern-blot检测E1A蛋白表达。流式细胞仪观察细胞凋亡率、免疫组化法检测HER-2/neu基因的表达水平,对比各组间的差异。结果 与对照组、空载体组相比,转染E1A基因后,E1ARNA和蛋白表达明显增高。SK-BR-3肿瘤细胞HER-2/neu的表达明显降低,凋亡率增高。结论 本实验成功构建并稳定表达了E1A基因质粒,明显抑制乳腺癌细胞的生长,说明E1A基因在乳腺癌基因治疗中有重要意义,为其临床应用提供了理论和实验依据。

关 键 词:E1A基因  乳腺癌  基因转染
文章编号:1007-4287(2007)07-0860-04
修稿时间:2006-10-17

Eukaryotic cell expression of E1A gene and study on effects on human breast cancer
YANG Xin-yu, GONG Lu-lu, LIU Zhi-yi,et al..Eukaryotic cell expression of E1A gene and study on effects on human breast cancer[J].Chinese Journal of Laboratory Diagnosis,2007,11(7):860-863.
Authors:YANG Xin-yu  GONG Lu-lu  LIU Zhi-yi  
Affiliation:The Sencond Hospital of Jilin University, Changchun 130033, China
Abstract:
Keywords:E1A gene  genetherapy  
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