| 基于RNAi抗PRSV番木瓜株系的培育及其分子特征验证 |
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| 引用本文： | 黄静,贾瑞宗,孔华,郭静远,王绪朋,郭安平.基于RNAi抗PRSV番木瓜株系的培育及其分子特征验证[J].热带作物学报,2017(3):513-520. |
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| 作者姓名： | 黄静 贾瑞宗 孔华 郭静远 王绪朋 郭安平 |
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| 作者单位： | 1. 海南大学农学院,海南海口 570228;中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口 571101;海南医学院基础医学与生命科学学院,海南海口 571199;2. 中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口,571101;3. 海南大学农学院,海南海口 570228;中国热带农业科学院热带生物技术研究所,海南海口 571101 |
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| 基金项目： | 农业部948项目(2014-Z17;2015-Z23)，海南省重点项目(ZDYF2016027)，海南省自然科学基金(20153145) |
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| 摘 要： | 根据RNAi原理构建的抗海南番木瓜环斑病毒(PRSV)植物表达载体p CAMBIA2300-35S-CP-RNAi-OCS,通过基因枪法将载体导入番木瓜的愈伤组织中,经卡那霉素抗性筛选后再分化成为植株。描述转化植株的分子特征同时进行抗病毒试验分析其抗病性。实验结果显示:转基因株系474为单拷贝插入的杂合子,插入位点在第7号染色体supercontig_61的717 141位置;抗病毒试验中,在接种病毒后28 d内非转基因株系1280有高浓度的病毒积累并很快表现出明显的病症,而转基因株系474基本无病毒积累且无发病症状。表明转基因株系474具有较好的PRSV抗性,有待于进一步田间试验。
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| 关 键 词： | 番木瓜环斑病毒 番木瓜 RNAi |
Breeding and Molecular Characteristion of RNAi Papaya for Resistance of Papaya Ringspot Virus |
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| Abstract: | RNAi-mediated virus resistance strategy was used to develop PRSV resistance papaya lines.A plant expression vector pCAMBIA2300-35S-CP-RNAi-OCS was constructed.The vector was transferred into papaya callus by particle bombardment,selected on kanamycin media.Transformation papaya lines were validated by PCR,RT-PCR,ddPCR,etc.The transgenic lines were further challenged with viral inoculation.The results showed that transgenic line 474 was single copy insertion and insertion site was located in papaya chromosome 7 supercontig_61 at 717 141 bp;non-transgenic line 1280 accumulated higher concentration of virus and developed symptoms,while transgenic line 474 was almost no virus accumulation.Transgenic line 474 was resistance to PRSV,which needed field test. |
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| Keywords: | Papaya ringspot virus (PRSV) papaya RNAi |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
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