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黑松银松素合成酶的cDNA克隆及表达研究
引用本文:杨晓,;宋修明,;王艳士,;李荣贵.黑松银松素合成酶的cDNA克隆及表达研究[J].青岛大学学报(工程技术版),2014(2):89-93.
作者姓名:杨晓  ;宋修明  ;王艳士  ;李荣贵
作者单位:[1]青岛大学生命科学学院,山东青岛266071; [2]青岛市森林病虫害防治工作站,山东青岛266000
基金项目:国家自然科学基金项目(31070575);青岛市科技发展计划项目(12-1-4-2-(1)-jch,12-1-3-46-nsh)
摘    要:松萎蔫病是由松材线虫引起的一种危害性极大的森林病害,为研究黑松对松材线虫的抗性机制,本文利用RT-PCR技术对黑松体内经转录组分析获得的与银松素合成酶mRNA高相似度的序列进行扩增,获得了银松素合成酶cDNA,然后将此银松素合成酶基因(PSL)克隆到表达载体pET-15b上,构建了重组表达质粒pET-15b-PSL,将其转化大肠杆菌BL21(DE3)后构建工程菌,通过IPTG诱导,工程菌高效表达重组蛋白,经Ni 2+螯合柱亲和层析得到了纯化重组银松素合成酶。该研究为了解黑松银松素合成酶的功能及松萎蔫病抗性松树的培育奠定了基础。

关 键 词:黑松  银松素合成酶  cDNA  克隆  表达

Cloning of the cDNA Encoding Pinosylvin Synthase from Pinus Thunbergii and Its Expression in Escherichia Coli
Affiliation:YANG Xiao, SONG Xiu-ming, WANG Yan-shi, LI Rong-gui(1. College of Life Science, Qingdao University, Qingdao 266071, China; 2. Qingdao Forest Pests Control Work Station, Qingdao 266000, China)
Abstract:
Keywords:pinosylvin synthase  pinus thunbergii  eDNA  cloning  expression
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