| αB-晶状体蛋白CRYAB基因重组表达载体的构建及分子生物学鉴定 |
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| 引用本文： | 陈强,陈思礼,郑芳.αB-晶状体蛋白CRYAB基因重组表达载体的构建及分子生物学鉴定[J].中南民族大学学报(自然科学版),2008,27(4). |
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| 作者姓名： | 陈强 陈思礼 郑芳 |
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| 作者单位： | 1. 武汉大学,第二临床学院基因诊断中心,武汉,430071
2. 中南民族大学,生命科学学院,武汉,430074 |
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| 基金项目： | 湖北省杰出青年基金资助项目
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| 摘 要： | 目的:构建人晶状体蛋白CRYAB基因与真核表达载体pIRES2-DsRed-Express的重组体,为研究人晶状体蛋白CRYAB基因的功能奠定基础.方法:根据人晶状体蛋白CRYAB基因的核苷酸序列,设计并合成分别带有酶切位点的引物,从pMD 18T-CRYAB基因克隆载体中扩增出CRYAB基因外显子片段,与载体pIRES2-DsRed-Express连接构建人晶状体蛋白CRYAB基因的表达载体,转化入大肠杆菌DH5α中.经抗生素筛选阳性克隆,通过酶切图谱分析、菌落PCR和测序鉴定所构建的表达载体.结果:构建的载体经PCR、酶切鉴定和测序证实插入方向正确,表达阅读框正确,载体构建成功.结论:重组人晶状体蛋白CRYAB基因表达载体的构建为研究CRYAB基因的功能及进一步研究先天性白内障的发病机制奠定了基础.
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| 关 键 词： | CRYAB基因 载体构建 鉴定 基因功能 机制 |
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