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重组柞蚕抗菌肽AD的纯化及鉴定
引用本文:耿艺介,张倩,王兴顺,李浩,杨小柯,李迎慧,黄自然,邓平建.重组柞蚕抗菌肽AD的纯化及鉴定[J].中国热带医学,2015,15(1):15-18.
作者姓名:耿艺介  张倩  王兴顺  李浩  杨小柯  李迎慧  黄自然  邓平建
作者单位:深圳市疾病预防控制中心;华南农业大学动物科学学院
摘    要:目的从重组柞蚕抗菌肽AD毕赤酵母发酵液中分离纯化出抗菌肽纯品,并对其进行纯度、分子量和抗菌作用的鉴定。方法用离子交换和疏水层析法对发酵液中的重组柞蚕抗菌肽AD进行分离纯化,用高效液相色谱法分析产物的纯度,再用基质辅助激光解析—飞行时间质谱仪对产物进行分子量鉴定,并结合传统微量肉汤稀释法和流式细胞术分析重组柞蚕抗菌肽AD纯品对E.coli敏感株及耐药株的抗菌作用。结果重组柞蚕抗菌肽AD经离子交换和疏水层析纯化后的纯度达到98.40%,分子量为4068.15Da,与所设计的重组柞蚕抗菌肽AD大小相近。所纯化出的重组柞蚕抗菌肽AD对E.coli的敏感株ATCC25922和产β-内酰胺酶耐药株株ATCC35218的抗菌作用均为MIC 8μg/m L,而头孢他啶和氨苄西林对耐药株ATCC35218的MIC的值分别为8μg/m L和>32μg/m L。结论成功纯化分离出具有自主知识产权的重组柞蚕抗菌肽AD,其对E.coli敏感株和耐药株具有相同的抗菌效果。

关 键 词:抗菌肽AD  高效液相色谱  基质辅助激光解析—飞行时间质谱  流式细胞术

Purification and identification of recombinant Cecropin AD
GENG Yi-jie;ZHANG Qian;WANG Xing-shun;LI Hao;YANG Xiao-ke;LI Ying-hui;Huang Zi-ran;DENG Ping-jian.Purification and identification of recombinant Cecropin AD[J].China Tropical Medicine,2015,15(1):15-18.
Authors:GENG Yi-jie;ZHANG Qian;WANG Xing-shun;LI Hao;YANG Xiao-ke;LI Ying-hui;Huang Zi-ran;DENG Ping-jian
Affiliation:GENG Yi-jie;ZHANG Qian;WANG Xing-shun;LI Hao;YANG Xiao-ke;LI Ying-hui;Huang Zi-ran;DENG Ping-jian;Shenzhen Municipal Center for Disease Control and Prevention;
Abstract:
Keywords:Cecropin AD  HPLC  MALDI-TOF/MS  FCM
本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录!
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