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| 通过叶绿体基因工程在烟草中合成中长链羟基脂肪酸聚酯 | |
| 引用本文： | 王玉华,张秀海,吴忠义,杨清,陈国强,吴琼,黄丛林.通过叶绿体基因工程在烟草中合成中长链羟基脂肪酸聚酯[J].科学通报,2005,50(10):979-986. |
| 作者姓名： | 王玉华 张秀海 吴忠义 杨清 陈国强 吴琼 黄丛林 |
| 作者单位： | 1. 南京农业大学生命科学学院,南京,210095;北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心,北京,100089 2. 北京市农林科学院北京农业生物技术研究中心,北京,100089 3. 南京农业大学生命科学学院,南京,210095 4. 清华大学生物科学与技术系,北京,100084 |
| 基金项目： | 感谢中国科学院植物研究所宋艳茹研究员的帮助.本工作为国家高技术研究发展计划资助项目(批准号:2002AA21305l). |
| 摘 要： | 中长链羟基脂肪酸聚酯(medium-chain-length-PHAs, mcl-PHAs)属于微生物聚酯. PHA合酶(PHA synthase, 由phaC基因编码)和3-羟酰基-酰基转移蛋白-辅酶A转移酶(3-hydroxyacyl-acyl carrier protein-coenzyme A transferase, 由phaG基因编码)是mcl-PHAs生物合成途径中的关键酶. 以aadA(氨基糖苷-3′-磷酸转移酶)基因做筛选标记, 分别构建了含phaC2基因的单价叶绿体转化表达载体pTC2以及同时嵌合phaC和phaG基因的双价叶绿体转化表达载体pTGC. 通过PDS1000/He基因枪转化法转化烟草, 获得具有壮观霉素抗性的叶绿体型转基因烟草植株, PCR和Southern Blot结果表明, 外源基因确已整合进烟草叶绿体基因组中且基本达到同质化. 气相色谱法检测转基因株系中的mcl-PHAs含量最高达4.8 mg/g干重, 合成的PHAs单体主要成分为3-羟基辛酸(3-hydroxyoctanoate, 3-HO)和3-羟基癸酸(3-dydroxydecanoate, 3-HD). 透射电子显微镜观察到转基因烟草叶片叶绿体中确有PHAs颗粒累积. |
| 关 键 词： | 中长链羟基脂肪酸聚酯 叶绿体基因工程 转基因烟草 植物生物反应器 |
| 收稿时间： | 2005-01-21 |
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