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| RNA干扰抑制Hep-2细胞人端粒酶逆转录酶基因表达对放射敏感性的影响 | |
| 作者姓名： | Qiu HB Zhou YF Zhou FX Xie CH Luo ZG Yu HJ Liu SQ |
| 作者单位： | 1. 441021,襄樊市中心医院肿瘤科 2. 武汉大学肿瘤防治研究中心 3. 430071,武汉大学中南医院肿瘤放化疗科 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金(30171063) |
| 摘 要： | 目的构建人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因特异性短发夹样RNA(shRNA)真核表达载体,观察其联合射线对人喉癌Hep-2细胞端粒酶活性和细胞存活的影响,研究hTERT基因在放射增敏中的作用。方法根据hTERT mRNA编码序列设计RNA干扰(RNAi)靶点,构建重组表达质粒pshRNA-hTERT,构建成功后,转染Hep-2细胞并作射线处理,用端粒重复序列扩增方法(TRAP-PCR- EHSA)检测端粒酶活性的动态变化,采用克隆形成分析方法观察质粒pshRNA-hTERT对Hep-2细胞放射敏感性的影响,计算放射增敏比SER_(SF2)。结果转染质粒pshRNA-hTERT后,Hep-2细胞的hTERT mRNA表达抑制率为60.8%,质粒pshRNA-hTERT不仅能够抑制Hep-2细胞的端粒酶活性(P<0.05),而且还可以抑制辐射诱导的端粒酶活性上升(P<0.05)。照射前经pshRNA-hTERT处理24h,明显降低了2Gy照射后Hep-2细胞的存活分数(85.7%),与单纯放射组(67.7%)相比,差异有统计学意义(P<0.05),pshRNA-hTERT的放射增敏比SER~(SF2)为1.27。结论RNAi显著抑制了靶基因hTERT的表达,质粒pshRNA-hTERT能明显抑制2Gy照射诱导的Hep-2细胞端粒酶活性升高,并显著提高其体外放射敏感性;质粒pshRNA-hTERT的放射增敏作用可能与端粒酶活性受抑制有关。 |
| 关 键 词： | RNAi 人端粒酶逆转录酶 Hep-2 端粒酶 放射敏感性 |
| 修稿时间： | 2006-03-20 |
Effective inhibition of hTERT expression by RNA interference on the radiosensitivity of human laryngeal cancer Hep-2 cell line |
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| Qiu HB,Zhou YF,Zhou FX,Xie CH,Luo ZG,Yu HJ,Liu SQ.Effective inhibition of hTERT expression by RNA interference on the radiosensitivity of human laryngeal cancer Hep-2 cell line[J].Chinese Journal of Oncology,2007,29(1):9-13. | |
| Authors: | Qiu Hui-bing Zhou Yun-feng Zhou Fu-xiang Xie Cong-hua Luo Zhi-guo Yu Hai-jun Liu Shi-quan |
| Affiliation: | Department of Oncological Chemotherapy and Radiotherpy, Zhongnan Hospital, Wuhan University, Wuhan 430071, China |
| Abstract: | |
| Keywords: | RNAi hTERT Hep-2 Telomerase radiosensitivity |
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