奶牛体细胞核移植胚胎产业化生产条件优化北大核心CSCD |
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引用本文: | 孙伟,巴特尔,郭继彤,李荣凤,王建国,李明,胡树香,王春生,李喜和.奶牛体细胞核移植胚胎产业化生产条件优化北大核心CSCD[J].生物技术通报,2013(2):86-92. |
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作者姓名: | 孙伟 巴特尔 郭继彤 李荣凤 王建国 李明 胡树香 王春生 李喜和 |
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作者单位: | 1.内蒙古赛科星繁育生物技术股份有限公司011517;2.内蒙古大学哺乳动物生殖生物学及生物技术教育部重点实验室010021;3.内蒙古大学蒙古高原动物遗传资源研究中心010021; |
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基金项目: | 内蒙古自治区"呼和浩特市科技计划项目"(2010-农-6) |
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摘 要: | 通过优化高产奶牛体细胞克隆胚胎体外生产技术条件,制备高质量的奶牛克隆胚胎,旨在提高奶牛体细胞核移植产业化应用效率。就受体卵母细胞去核方法、不同年龄供体牛细胞来源、血清饥饿与否以及不同气相组成培养等条件对奶牛体细胞克隆胚胎生产效率的影响进行了研究和探讨。结果表明,虽然荧光染色辅助去核和盲吸法的去核率、囊胚发育率分别为100%、24.83%和92.44%、28.26%,两者之间无显著差异(P>0.05),但盲吸法操作简单、效率高;不同年龄来源供体牛的细胞系构建的克隆胚胎的囊胚发育率分别为31.43%、25.68%,两者之间没有显著差异(P>0.05);经血清饥饿和未饥饿供体细胞重构的克隆胚胎囊胚发育率分别为24%、29.9%,两者之间没有显著差(P>0.05);富氧和低氧气相培养的克隆胚胎的囊胚发育率分别为28.26%、31.55%,两者之间差异不显著(P>0.05),低氧气相组成更有利于囊胚的发育。根据上述结果,奶牛体细胞核移植胚胎(克隆胚胎)的产业化生产条件为:供体细胞无需进行同期饥饿处理,直接注入到盲吸去核后的受体卵子透明带下构建克隆胚胎,融合后的克隆胚胎在密封的混合三气(5%CO2-5%O2-90%N2)的气相组成下进行体外培养,能保持稳定的囊胚发育率。
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关 键 词: | 奶牛 体细胞 去核 核移植 重构胚胎 |
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