| 多重PCR方法检测大肠杆菌O157:H7的初步研究 |
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| 引用本文： | 朱文冠,薛素强,洪洁心,崔剑峰,郭霄峰.多重PCR方法检测大肠杆菌O157:H7的初步研究[J].中国人兽共患病杂志,2006,22(5):428-432. |
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| 作者姓名： | 朱文冠 薛素强 洪洁心 崔剑峰 郭霄峰 |
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| 作者单位： | [1]华南农业大学兽医微生物教研室,广州510642 [2]广东出入境检验检疫局,广州510642 [3]广东省东莞市兽医防疫检疫站,广州510642 |
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| 基金项目： | 广东省科研项目;广东省广州市科技攻关项目 |
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| 摘 要： | 目的研究一种快速、特异的检测大肠杆菌O157：H7的多重PCR方法。方法以大肠杆菌O157：H7的O157抗原基因（rfbE基因）、鞭毛H7抗原基因（fliC基因）、粘附素基因（eaeA基因）和志贺样毒素Ⅰ、Ⅱ（SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因）为扩增对象，设计能导至目的片段大小不同的5对引物，通过优化条件，建立了可用于粪便检测的大肠杆菌5重PCR。结果在同一扩增体系中，检测了5株不同来源的大肠杆菌O157：H7及27株非大肠杆菌O157：H7细菌。结果表明，该方法能从2株大肠杆菌O157：H7中扩增出rfbE、fliC、eaeA、SLT-Ⅰ、SLT-Ⅱ基因，它们的大小分别为582bp、802bp、487bp、368bp和177bp。而另外3株大肠杆菌O157：H7也能扩增出除eaeA、SLT-Ⅱ基因外的其它3个基因片段。表明该方法可用于检测大肠杆菌O157：H7，还可检测细菌是否含有毒素基因。在检测27株非大肠杆菌O157：H7．除O149出现SLT-Ⅱ扩增产物和01：H7出现flic基因扩增产物外，其它非大肠杆菌O157：H7的扩增结果均为阴性，表明该方法有较高的特异性。当粪便样品经增菌培养12h，用该5重PCR体系能检测出最初接种量为5cfu／g粪便的样品。结论本5重PCR方法具有较高的特异性和敏感性，可迅速、有效地将大肠杆菌O157：H7与其它非大肠杆菌O157：H7相区别，同时还能检测O157：H7中的毒力因子。因此，通过进一步研究，本方法有望应用于临床大肠杆菌O157：H7感染的辅助诊断。
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| 关 键 词： | 大肠杆菌O157:H7 PCR rfbE基因 fliC基因 eaeA基因 SLT-Ⅰ基因 SLT-Ⅱ基因 |
| 文章编号： | 1002-2694(2006)05-0428-05 |
| 收稿时间： | 2005-08-11 |
| 修稿时间： | 2005-12-19 |
Detection of Escherichia coli O157:H7 by multiplex polymerase chain reaction |
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| ZHU Wen-guan,XIE Shu-qiang,HONG Jie-xin,CUI Jian-feng,GUO Xiao-feng.Detection of Escherichia coli O157:H7 by multiplex polymerase chain reaction[J].Chinese Journal of Zoonoses,2006,22(5):428-432. |
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| Authors: | ZHU Wen-guan XIE Shu-qiang HONG Jie-xin CUI Jian-feng GUO Xiao-feng |
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| Affiliation: | Veterinary Medicine College, South China Agricultural University, Guangzhou 510642, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Esherichia coli O157:H7 multiplex PCR rfbE gene fliC gene eaeA gene slt-I gene slt-II gene |
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