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| 多因子联合诱导人胚胎干细胞定向分化为肝细胞样细胞 | |
| 引用本文： | 崔罗方,商昌珍,任萌,曹君,吕丽虹,陈亚进,闵军.多因子联合诱导人胚胎干细胞定向分化为肝细胞样细胞[J].中华实验外科杂志,2012,29(5). |
| 作者姓名： | 崔罗方 商昌珍 任萌 曹君 吕丽虹 陈亚进 闵军 |
| 作者单位： | 1. 中山大学干细胞与组织工程研究中心,广州,510120 2. 中山大学孙逸仙纪念医院肝胆胰外科 3. 中山大学孙逸仙纪念医院内分泌科 |
| 基金项目： | 国家高技术“863”研究发展计划资助项目，国家自然科学基金资助项目，广东省自然科学基金博士启动基金资助项目，教育部博士点新教师基金资助项目 |
| 摘 要： | 目的 建立有效的体外诱导人胚胎干细胞(hESCs)分化为肝细胞样细胞的培养体系.方法 将H9 hESC细胞株接种到基底膜提取物包被的培养板上,序贯加入含有下列诱导因子的分化培养基诱导分化:100μg/L细胞因子活化素A( activin A)诱导3d,20 μg/L骨形成蛋白4(BMP-4)和10 μg/L碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)诱导4d,10μg/L肝细胞生长因子(HGF)诱导5d,最后以含10 μg/L制瘤素M(OSM)及1×10-7 mol/L地塞米松(Dex)的培养液继续诱导4d.于细胞诱导分化第16天,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及免疫荧光检测分化细胞肝脏特异性基因和蛋白表达水平；过碘酸-雪夫反应(PAS)试验和吲哚氰绿(ICG)摄取试验检测分化细胞是否具备肝细胞功能.结果 activin A、BMP-4、bFGF、HGF、OSM和Dex联合诱导的分化细胞具有类似肝细胞的形态结构,呈多角形或卵圆形；RT-PCR结果显示分化第16天的细胞表达甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白7(CK7)、细胞角蛋白19(CK19)、肝细胞核因子-4α(HNF4-α)、1-抗胰蛋白酶(AAT)等肝脏特异性基因；免疫荧光化学检测结果显示分化第16天的细胞表达AFP、ALB、CK19、CYP7A1等肝脏特异性蛋白；PAS试验及ICG试验显示分化细胞具备糖原合成和ICG摄取释放等肝细胞功能.结论 体外联合多种诱导因子可诱导hESCs定向分化为肝细胞样细胞. |
| 关 键 词： | 胚胎干细胞 肝细胞样细胞 分化 |
Combination of different factors directly induces human embryonic stem cells into hepatocyte-like cells |
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| CUI Luo-fang , SHANG Chang-zhen , REN Meng , CAO Jun , LU Li-hong , CHEN Ya-jin , MIN Jun.Combination of different factors directly induces human embryonic stem cells into hepatocyte-like cells[J].Chinese Journal of Experimental Surgery,2012,29(5). | |
| Authors: | CUI Luo-fang SHANG Chang-zhen REN Meng CAO Jun LU Li-hong CHEN Ya-jin MIN Jun |
| Abstract: | |
| Keywords: | Embryonic stem cells Hepatocyte-like cells Differentiation |
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