27-羟基胆甾醇诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的调控机制 |
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引用本文: | 朱梦娇,黄燕燕,曹立,唐维国.27-羟基胆甾醇诱导人神经母细胞瘤细胞凋亡的调控机制[J].浙江医学,2018(18):1996-2000,2012. |
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作者姓名: | 朱梦娇 黄燕燕 曹立 唐维国 |
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作者单位: | 温州医科大学附属舟山医院神经内科 |
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基金项目: | 浙江省科技计划项目(2014C33132) |
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摘 要: | 目的探讨27-羟基胆甾醇(27-OHCH)诱导人神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y)凋亡的调控机制。方法不同浓度(0、3.125、6.25、12.5、25.0、50.0滋M)的27-OHCH作用SH-SY5Y细胞,采用CCK-8法检测细胞存活率,在光学显微镜下观察27-OHCH处理组、添加苏氨酸蛋白激酶(AKT)抑制剂(LY294002)的27-OHCH处理组细胞形态变化,Westernblot法检测磷酸化AKT(p-AKT)、cleaved-caspase-9蛋白表达,AnnexinV-PE/7-AAD双染流式细胞仪检测细胞凋亡情况。结果给药24h,12.5、25.0、50.0滋M27-OHCH处理组SH-SY5Y细胞存活率均明显降低(均P<0.05);给药48h,不同浓度(3.125~50.0滋M)27-OHCH处理组SH-SY5Y细胞存活率均明显降低(均P<0.05)。在显微镜下观察发现,27-OHCH能诱导SH-SY5Y细胞凋亡,使细胞数量减少,而LY294002能减弱27-OHCH诱导的细胞毒效应。随着27-OHCH处理组浓度的增加,SH-SY5Y细胞内p-AKT(Ser473)、cleaved-caspase-9(37/35kD)表达明显增强;经LY294002预作用后,不同浓度(0~50.0滋M)27-OHCH处理组p-AKT(Ser473)表达均受抑制,而12.5、25.0、50.0滋M27-OHCH处理组cleaved-caspase-9蛋白表达变化不明显。给药48h,12.5、25.0滋M27-OHCH处理组均能引起SH-SY5Y细胞凋亡效应,而LY294002预作用2h能逆转细胞凋亡效应(均P<0.05)。结论27-OHCH可通过AKT信号通路诱导SH-SY5Y细胞凋亡。
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关 键 词: | 27- 羟基胆甾醇 人神经母细胞瘤细胞 细胞凋亡 AKT 信号通路 |
27-hydroxycholesterol induces apoptosis of human neuroblastoma cells through AKT signaling pathway |
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Affiliation: | Affiliated Zhoushan Hospital of Wenzhou Medical University |
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Abstract: | |
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Keywords: | 27-hydroxycholesterol SH-SY5Y cells Apoptosis AKT signaling pathway |
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