| 乙型肝炎病毒前C区及基本核心启动子变异检测方法的比较研究 |
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| 引用本文： | 丁静娟,刘悦晖,王梅.乙型肝炎病毒前C区及基本核心启动子变异检测方法的比较研究[J].中华检验医学杂志,2006,29(5):402-406. |
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| 作者姓名： | 丁静娟 刘悦晖 王梅 |
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| 作者单位： | 550004,贵阳医学院附院感染科实验室 |
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| 基金项目： | 贵州省优秀科技教育人才省长基金资助[黔省专合字（2005）71号] |
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| 摘 要： | 目的 建立错配聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（mPCR-RFLP）检测乙型肝炎病毒（HBV）前C区A1896、基本核心启动子（BCP）T1762/A1764双变异的方法,与直接测序法比较,评估其应用价值.方法 利用错配PCR的原理扩增HBV前C区长194 bp、C启动子区长184 bp的基因片段,扩增产物分别经限制性内切酶Bsu36I、BclI酶切,琼脂糖凝胶电泳,根据酶切图谱多态性,建立检测HBV前C A1896、BCP T1762/A1764双变异的方法,对127份HBsAg、HBV DNA阳性的HBV感染者血清进行分析,酶切同时测序.2份标本用克隆测序以验证酶切鉴定变异株、野株混合感染的准确性.结果 127份血清中125（98.42%）份能用酶切、121（95.21%）份能用测序分析HBV前CA1896、BCP T1762/A1764状况.酶切与测序均成功的119份血清中,16份为前C区A1896变异株,34份为BCP T1762/A1764双变异株,21份为前C区A1896、BCP T1762/A1764联合变异株,48份为前C区G1896、BCP A1762/G1764野株,酶切与测序的结果完全一致.1份酶切鉴定为前C区A1896、G1896混合感染标本的5个克隆子中,1个为前C区A1896变异株,另外4个为前C区G1896野株;另1份酶切鉴定为单纯前C区A1896变异标本的5个克隆子均为前C区A1896变异株,酶切分析结果与克隆测序结果完全相符.结论 与测序法相比,本方法较简便、特异性强,能区分野毒株、变异株混合感染,适合较大样本分析,可用于流行病学调查及临床筛查.
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| 关 键 词： | 肝炎病毒 乙型 变异 限制性片段长度多态性 测序 |
| 收稿时间： | 2005-09-15 |
| 修稿时间： | 2005年9月15日 |
Comparative study on detection methods of mutations in hepatitis B virus precore and basic core promoter |
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| DING Jing-juan,LIU Yue-hui,WANG Mei.Comparative study on detection methods of mutations in hepatitis B virus precore and basic core promoter[J].Chinese Journal of Laboratory Medicine,2006,29(5):402-406. |
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| Authors: | DING Jing-juan LIU Yue-hui WANG Mei |
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| Affiliation: | Department of Infectious Diseases, Guiyang Medical College, Guizhou 550004 , China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Hepatitis B virus Mutation Restriction fragment length polymorphism Sequencing |
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