| 多重PCR快速检测金黄色葡萄球菌四型肠毒素基因的研究 |
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| 引用本文： | 杨玉军,黄韦唯,王志云,刘衡川,余倩,汪川.多重PCR快速检测金黄色葡萄球菌四型肠毒素基因的研究[J].现代预防医学,2009,36(9). |
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| 作者姓名： | 杨玉军 黄韦唯 王志云 刘衡川 余倩 汪川 |
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| 作者单位： | 1. 攀枝花学院医学院基础医学教研室,攀枝花,617000
2. 四川大学华西公共卫生学院医检教研室 |
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| 摘 要： | 目的]建立一种快速、高效地检测金黄色葡萄球菌SEA、SEB、SEC和SED基因的多重PCR法并进行优化. 方法]试剂盒提取产肠毒素金黄色葡萄球菌基因组DNA作为模板,根据SEA、SEB、SEC和SED肠毒素基因片段保守区序列设计引物,多重PCR扩增产肠毒素金黄色葡萄球菌基因组中特异靶序列.对反应体系Mg2+浓度、引物浓度和退火温度进行优化,并初步检测方法特异性. 结果]在PCR反应体系中加入设计的4对引物可同时扩增出金黄色葡萄球菌四型肠毒素基因中的特异序列;在总体积为25 μl的反应体系中,最优Mg2+浓度为2.0 mmol/L,引物浓度分别为0.2 μmol/L,退火温度为49℃;以大肠杆菌O157:H7和肠炎沙门菌510041基因组DNA为模板扩增不出特异片段. 结论]成功建立金黄色葡萄球菌四型肠毒素基因多重PCR法,该法能快速、高效地同时检测SEA、SEB、SEC和SED基因,比传统PCR方法省时省力,可以弥补传统PCR法的不足.
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| 关 键 词： | 多重PCR 金黄色葡萄球菌 肠毒素 |
A STUDY ON FAST DETECTION OF FOUR KINDS OF STAPHYLOCOCCUS AUREUS ENTEROTOXINS GENES WITH A MULTIPLEX PCR METHOD |
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