| 靶向人Ku70 mRNA反义核苷酸的优化设计与筛选 |
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| 引用本文： | 王雪峰,尹永杰,杨华,王占义,王飞,穆亚冰,翟仁义.靶向人Ku70 mRNA反义核苷酸的优化设计与筛选[J].吉林大学学报(医学版),2007,33(6):1091-1093. |
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| 作者姓名： | 王雪峰 尹永杰 杨华 王占义 王飞 穆亚冰 翟仁义 |
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| 作者单位： | 1.吉林大学第二医院妇产科，吉林 长春 130041；2.军事医学科学院放射医学研究所，北京 100850；3.中国人民解放军总医院妇产科，北京 100853 |
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| 基金项目： | 吉林省长春市科技局科研项目 |
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| 摘 要： | 目的：联合应用RNAdraw和Sfold软件设计并筛选低毒且高效抑制Hela细胞Ku70 mRNA表达的反义寡核苷酸。方法：从GenBank获得人Ku70 mRNA全序列，联合应用RNAdraw与Sfold软件，根据最小自由能原理设计多条20 nt的反义寡核苷酸，脂质体转染后MTT法检测其非序列特异性细胞毒性，选择毒性最小者并转染Hela细胞，RT-PCR检测转染前后Ku70 mRNA的表达水平并进行比较。结果：靶向Ku70 mRNA设计6条20 nt的反义寡核苷酸，其中NO.1 序列非特异性毒性最低，对Hela细胞的生长抑制率（50、100和200 nmol?L-1浓度组分别为4.8%、9.5%和10.2%）与脂质体组比较差异无显著性(P>0.05)，用毒性最低序列转染Hela细胞后使Ku70 mRNA表达水平显著降低(P<0.01)，条带强度和面积与未转染组比较分别下降81.6%和77.6%。结论：联合应用计算机软件RNAdraw和Sfold对设计反义核酸有较大的指导意义，能实现较高的命中率，设计的反义寡核苷酸能有效抑制Hela 细胞Ku70mRNA的表达。
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| 关 键 词： | 寡核苷酸类 反义 Hela细胞 逆转录聚合酶链反应 |
| 文章编号： | 1671-587X（2007）06-1091-03 |
| 收稿时间： | 2007-03-26 |
| 修稿时间： | 2007年3月26日 |
Application of oxygen concentration in expiratory gas and oxygen saturation of blood in oral and maxillofacial surgery |
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