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应用长臂光敏生物素核酸探针检测医学真菌的研究
引用本文:陈建魁,尹秀云,高亚兵,佟雅丽,李玉荣,朱晓华,彭瑞云,牟兆钦.应用长臂光敏生物素核酸探针检测医学真菌的研究[J].中国卫生检验杂志,2003,13(2):158-159.
作者姓名:陈建魁  尹秀云  高亚兵  佟雅丽  李玉荣  朱晓华  彭瑞云  牟兆钦
作者单位:1. 军事医学科学院附属307医院,北京,100039
2. 军事医学科学院放射医学研究所,北京,100850
摘    要:目的]建立PCR结合长臂光敏生物素核酸探针杂交检测医学真菌的方法。方法]首先合成医学真菌通用引物,用PCR扩增白色念珠菌18S rRNA基因,用长臂光敏生物素标记纯化的扩增产物作为核酸探针,然后用此探针对PCR后的基因扩增产物进行Southern杂交检测医学真菌。通过用白色念珠菌感染人鼠,建立念珠菌病的实验动物模型,验证血培养法、PCR法和PCR扩增及Southern杂交检测医学重要真菌的敏感性。结果]通用引物可以扩增白色念珠菌、热带念珠菌、新型隐球菌、黄曲霉菌、烟曲霉菌等9种医学常见真菌的18S rRNA基因,扩增片段长度为621-687bp。此引物只扩增真菌DNA,不扩增临床常见的细菌、病毒和哺乳动物组织细胞DNA。利用实验动物模型比较了血培养法、PCR法和PCR扩增及长臂光敏生物素核酸探针Southern杂交法检测真菌血症的灵敏度,实验证明后者的敏感性最高。结论]本方法快速、敏感、不需放射性同位素,有较好的临床应用前景。

关 键 词:长臂光敏生物素  核酸探针  检测  医学真菌  白色念珠菌  动物模型  基因扩增产物
文章编号:1004-8685(2003)02-0158-02
修稿时间:2002年1月10日

The detection of medical fumgi using DNA probe labelled with long arm photobiotin
Chen Jiankui,Yin Xiuyun,Gao Yabing et al.The detection of medical fumgi using DNA probe labelled with long arm photobiotin[J].Chinses Journal of Health Laboratory Technology,2003,13(2):158-159.
Authors:Chen Jiankui  Yin Xiuyun  Gao Yabing
Affiliation:Chen Jiankui Yin Xiuyun Gao Yabing et al.The affiliated 307 Hospital of Academy of Military Medical Sciences,Beijing 100039 China
Abstract:
Keywords:Medicam fungi  Long arm photobiotin  DNA probe  Animal model
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