| MDR1 基因单靶点双荧光素酶报告基因系统的建立 |
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| 引用本文： | 李长龙,萨晓婴.MDR1 基因单靶点双荧光素酶报告基因系统的建立[J].中国比较医学杂志,2008,18(9). |
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| 作者姓名： | 李长龙 萨晓婴 |
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| 作者单位： | 浙江省医学科学院,浙江省实验动物中心,浙江省实验动物与安全性研究重点实验室,杭州,310013 |
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| 基金项目： | 浙江省科技厅实验动物公共服务平台项目 |
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| 摘 要： | 目的通过构建以MDR1启动子为启动序列的双荧光素酶报告基因系统并进行活性分析，为MDR1基因表达的单靶点调控研究和逆转剂的筛选提供一种有效的方法。方法从HCT-8细胞中提取DNA并克隆含有MDR1基因启动子中Y—box序列。将该序列重组到萤光素酶报告基因载体pGL-3．Basic的启动区域中，从而构建报告基因载体pGL-MDR1。将pGL-MDR1和pRL-TK载体共转染到HCT-8和HCT-8／VCR细胞中。通过调节不同载体的比例来优化转染效率。利用MDRI基因激活剂（热诱导）和抑制剂（EGCG）等处理来分析其启动转录活性受外界因素的影响。结果通过直接测序法验证了pGL-MDR1含有MDR1基因启动子Y—box序列且没有出现碱基突变。在pGL-MDR1和pRL-TK的转染比例为5：5时，转染效率最高并具有最高的萤光素酶活性。通过MDR1基因激活处理后表现为时间依赖性地激活MDR1基因的表达，而MDR1基因抑制剂的作用则相反。结论MDR1启动子为启动序列的双荧光素酶报告基因系统建立成功。该系统不但可以用于研究活体生物发光成像和MDRI基因表达的机理，而且可用于单靶点的多药耐药抑制剂的筛选。
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| 关 键 词： | MDR1 启动子 荧光素酶报告基因 活性鉴定 |
Establishment of Dual Luciferase Report Gene System Driven by Single Target MDR 1 Promoter |
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| LI Chang-long,SA Xiao-ying.Establishment of Dual Luciferase Report Gene System Driven by Single Target MDR 1 Promoter[J].Chinese Journal of Comparative Medicine,2008,18(9). |
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| Authors: | LI Chang-long SA Xiao-ying |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | MDR1 |
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