LC-MS/MS法测定粪便样品中百可利和黄芩苷的浓度及在粪便排泄中的应用

目的:建立LC-MS/MS法测定人粪便中百可利和黄芩苷的浓度，研究中国健康人单剂量口服百可利咀嚼片后百可利和黄芩苷在粪便中的排泄过程。方法:采用Phenomenex Synergi 4u MAX-RP 80 C12色谱柱（2.0 mm×150 mm，4 μm）；流动相组成包含有机相B：乙腈-甲醇（50∶50，V/V，含0.5%甲酸），水相 A：3 mmol/L乙酸铵水溶液（含0.5%甲酸）。正离子方式检测，扫描方式为多反应监测（MRM），采用甲醇直接沉淀法处理粪便样品；8例健康受试者口服百可利咀嚼片400 mg，采用LC-MS/MS法测定粪便中百可利和黄芩苷浓度，计算48 h累积排泄率。结果: 粪便中百可利的线性浓度范围为100～20 000 ng/mL，黄芩苷为10～4 000 ng/mL。百可利定量下限为100 ng/mL，黄芩苷为10 ng/mL，批内、批间精密度均小于15%。百可利、黄芩苷经过样品预处理后在自动进样器中放置24 h、3次反复冻融、以及在-70 ℃冰箱中保存6个月内均稳定。样品稀释20倍、200倍后检测，百可利、黄芩苷的准确度和精密度均满足要求。8名健康受试者单剂量口服400 mg百可利咀嚼片后，原药百可利的48 h累积排泄率为（36.32±16.52）%，主要代谢产物黄芩苷的48 h累积排泄率为（0.96±0.54）%。结论:本方法操作简单，灵敏度高，选择性高，适合于百可利咀嚼片及其体内代谢物黄芩苷在中国健康受试者粪便中排泄的研究。