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对甜菜夜蛾高杀虫毒力苏云金杆菌菌株的筛选及cry2Ah5的克隆表达
引用本文:张雅昆,赵丹,郭巍,王伟,陆秀君,李瑞军.对甜菜夜蛾高杀虫毒力苏云金杆菌菌株的筛选及cry2Ah5的克隆表达[J].中国生物防治学报,2016(3):414-420.
作者姓名:张雅昆  赵丹  郭巍  王伟  陆秀君  李瑞军
作者单位:1. 河北农业大学植物保护学院,保定,071001;2. 北京农学院植物科学技术学院,北京,102206
基金项目:国家自然科学基金(31471775),现代农业产业技术体系(CARS-14)
摘    要:利用生物活性测定方法从本实验室已分离保存的Bt菌株中筛选出了5株对甜菜夜蛾具有较高杀虫毒力的菌株。该5株Bt菌株对甜菜夜蛾初孵幼虫的LC50值为0.556~0.914 mg/mL胞晶混合物,其中GS3菌株杀虫活性最高,LC50值为0.556 mg/mL胞晶混合物;包含晶体形态主要是球形、大菱形、小菱形等;所含基因类型主要是cry1Aa、cry1Ab、cry1La、cry1Ia、cry1Ib、cry2Ab、cry2Ad、cry2Ah、cry7Ab、cry9Ba等;5株菌株均表达约60 kD和130~150 kD蛋白,其中2株还表达较弱的80 kD蛋白。从GS3菌株中克隆得到一种新的cry2A基因,Gen Bank登录号为KT692984,由Bt基因国际命名委员会命名为cry2Ah5。该基因开放阅读框为1899 bp,编码632个氨基酸,编码蛋白分子量为70.8 kD,等电点p I为8.18,与其他Cry2Ah蛋白序列相似性为97%~99%。该基因在大肠杆菌BL21(DE3)中表达约70 kD蛋白,与预测分子量相符。本研究筛选得到5株对甜菜夜蛾具有较高杀虫毒力的Bt菌株,克隆表达了一种新的cry2A基因cry2Ah5,为甜菜夜蛾的生物防治提供了新的菌株及基因资源。

关 键 词:苏云金杆菌  甜菜夜蛾  cry基因  cry2Ah5

Screening of Bacillus thuringiensis Strains with High Toxicity against Spodoptera exigua and Identification of a New cry2Ah5 Gene
Abstract:
Keywords:Bacillus thuringiensis  Spodoptera exigua  cry gene  cry2Ah5
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