| 转录因子E2F-1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定 |
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| 引用本文： | 王晓通,李雷,钱倩,谢玉波,肖强.转录因子E2F-1基因RNA干扰慢病毒载体的构建与鉴定[J].广西医科大学学报,2010,27(2):165-168. |
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| 作者姓名： | 王晓通 李雷 钱倩 谢玉波 肖强 |
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| 作者单位： | 1. 广西医科大学第七附属医院神经外科,梧州,543000
2. 广西医科大学第一附属医院麻醉科 |
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| 摘 要： | 目的：构建细胞周期相关转录因子E2F-1RNA干扰（RNAi）慢病毒表达载体。方法：选取E2F-1基因的19nt特异性序列,设计针对E2F-1的shRNA序列,应用基因重组技术克隆到pLentiLox3.7（pLL3.7）慢病毒表达载体中,XbaI和NotI进行双酶切和DNA测序鉴定重组克隆,在脂质体的介导下将慢病毒的混合包装载体质粒和包含E2F-1基因RNAi的重组慢病毒载体共转染293FT细胞,包装成病毒48h后,收集病毒颗粒,孔稀释法测定病毒滴度。结果：双酶切证实shRNA正确插入慢病毒载体,DNA测序证实插入的序列正确;293FT细胞包装E2F-1基因RNAi的重组慢病毒载体成功;收集的细胞培养上清液中,病毒的滴度为5×10^7TU/mL。结论：成功构建人E2F-1基因RNAi慢病毒载体,为研究E2F-1对于胃癌生长的影响提供了稳定的转染细胞载体。
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| 关 键 词： | 慢病毒载体 E2F-1 RNAi |
CONSTRUCTION AND IDENTIFICATION OF LENTIVIRAL VECTOR FOR RNA INTERFERENCE OF E2F TRANSCRIPTION FACTOR 1 GENE |
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| Affiliation: | Wang Xiaotong,Li Lei,Qian Qian,et al.(Department of Surgery,the First Affiliated Hospital of Guangxi Medical University,Nanning 530021 China) |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | E2F-1 RNAi |
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