猪β-干扰素的原核表达及其对猪流行性腹泻病毒的抑制作用研究 |
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引用本文: | 曹瑞兵,包晶晶,周海霞,郑其升,周斌,陈溥言.猪β-干扰素的原核表达及其对猪流行性腹泻病毒的抑制作用研究[J].中国病毒学,2004,19(4):364-368. |
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作者姓名: | 曹瑞兵 包晶晶 周海霞 郑其升 周斌 陈溥言 |
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作者单位: | 南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室,江苏南京,210095 |
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摘 要: | 本研究通过PCR技术克隆了猪β干扰素全基因,设计引物亚克隆猪β干扰素成熟蛋白编码基因并对,5'端1个稀有密码子进行了大肠杆菌偏嗜性改造.构建了猪IFN-β原核单纯表达载体pRLC-poIFNβ,实现了poIFN-β在大肠杆菌中的表达,表达产物约占菌体总蛋白的17.3%.表达产物以包涵体形式存在,用含6mol/L盐酸胍的变性液溶解及含GSH-GSSG复性液复性处理,复性后的表达产物经凝胶层析纯化后,MDBK细胞-VSV病变抑制法测定结果表明,重组猪β干扰素具有良好的抗病毒活性,约为5.6x105U/mg.用重组猪β干扰素处理猪肾传代细胞PK-15后,细胞病变抑制法(CPE50)测定结果表明重组猪β干扰素可显著抑制猪流行性腹泻病毒(PEDV)的感染.
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关 键 词: | 猪β干扰素 原核表达 猪流行性腹泻病毒 |
文章编号: | 1003-5125(2004)04-0364-05 |
修稿时间: | 2003年12月26 |
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