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应用抑制消减杂交技术筛选颞叶癫痫的相关基因
引用本文:李璐,刘玲,刘晓丽,刘军莉,赵敬杰,尚伟.应用抑制消减杂交技术筛选颞叶癫痫的相关基因[J].山东大学学报(医学版),2011,49(11):44-47,68.
作者姓名:李璐  刘玲  刘晓丽  刘军莉  赵敬杰  尚伟
作者单位:山东大学第二医院 1. 神经内科; 2.分子生物学实验室, 济南 250033
基金项目:山东省中青年科学家科研奖励基金资助项目(2006BS03004); 山东省自然科学基金资助项目(Y2007C093)
摘    要:目的 构建颞叶癫痫大鼠海马组织差异表达基因的消减cDNA 文库,筛选颞叶癫痫的差异基因。方法 采用抑制消减杂交方法,以正常大鼠和癫痫大鼠的海马组织作为对比材料,分离组织中差异表达基因的cDNA 片段,将其与T载体进行T/A连接构建文库,将连接产物转化大肠杆菌进行文库扩增后,随机挑取100个白色克隆,用菌落PCR法筛选差异基因克隆,并进行测序分析。结果 获得14个在癫痫大鼠海马组织中有差异表达,并与大鼠的已知基因片段高度同源的基因。 结论 抑制消减杂交技术是一种高效的筛选差异表达基因的方法,颞叶癫痫大鼠海马组织中存在许多差异表达基因,为深入研究癫痫发病的分子机制提供重要线索。

关 键 词:抑制消减杂交技术  癫痫  颞叶  海马  基因表达  
收稿时间:2011-05-12

Application of suppression subtractive hybridization to screen for temporal lobe epilepsy-related genes
LI Lu,LIU Ling,LIU Xiao-li,LIU Jun-li,ZHAO Jing-jie,SHANG Wei.Application of suppression subtractive hybridization to screen for temporal lobe epilepsy-related genes[J].Journal of Shandong University:Health Sciences,2011,49(11):44-47,68.
Authors:LI Lu  LIU Ling  LIU Xiao-li  LIU Jun-li  ZHAO Jing-jie  SHANG Wei
Affiliation:1. Department of Neurology;  2. Laboratory of Molecular Biology, The Second Hospital of
 Shandong University, Jinan 250033, China
Abstract:Objective To construct a subtracted cDNA library of differentially expressed genes in the hippocampus of rats with temporal lobe epilepsy,and to screen for differentially expressed genes related to temporal lobe epilepsy.Methods Suppression subtractive hybridization(SSH) was used for isolating cDNA fragments of differentially expressed genes in the hippocampus of temporal lobe epilepti rats,and normal hippocampus tissues were controls.The products of SSH were directly inserted into the T/A cloning vector to...
Keywords:Suppression subtractive hybridization  Epilepsy  temporal lobe  Hippocampus  Gene expression  
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