| 成年大脑神经细胞特异性ADAM10基因敲除小鼠模型的建立与鉴定 |
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| 引用本文： | 刘军,周常文,韦秋兰,庄建龙,林炤华,郑杰辉.成年大脑神经细胞特异性ADAM10基因敲除小鼠模型的建立与鉴定[J].遗传,2012,34(12):1570-1576. |
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| 作者姓名： | 刘军 周常文 韦秋兰 庄建龙 林炤华 郑杰辉 |
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| 作者单位： | 福建医科大学基础医学院细胞生物学与遗传学系, 细胞与发育工程研究中心, 干细胞工程与再生医学福建省高校重点实验室, 福州 350004 |
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| 基金项目： | 福建省自然科学基金项目(编号:2010j01171);福建医科大学科研发展基金项目(编号:XZ04005)资助 |
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| 摘 要： | 去整合素和金属蛋白酶10(ADAM10)是一种能够水解30余种跨膜蛋白质的“脱落酶”(sheddase), 参与诸多生理过程和致病机制, 如胚胎发育、细胞粘附、信号转导、免疫反应、癌症和阿尔茨海默病。迄今, 已报道的ADAM10完全基因敲除小鼠和大脑神经前体细胞特异性ADAM10基因敲除小鼠分别于胚胎期或围产期死亡, 致使无法研究成年小鼠大脑神经细胞ADAM10基因的功能。文章利用本研究小组建立的CaMKIIα-Cre转基因小鼠与ADAM10loxP/loxP转基因小鼠杂交, 获得了CaMKIIα-Cre/ADAM10loxP/loxP小鼠, 并对其进行鉴定。利用PCR方法检测成年ADAM10 cKO小鼠大脑基因组DNA表明, ADAM10基因缺失主要发生在前脑皮层和海马中。荧光定量PCR检测结果显示, ADAM10 mRNA的表达水平在前脑皮层和海马中分别降低55.7%和60.8% ; 使用Western blotting方法研究发现, ADAM10成熟蛋白质的含量在前脑皮层和海马中分别减少63%和84.8% 。采用免疫组织化学方法检测表明, 成年ADAM10 cKO小鼠与野生型小鼠相比, 其大脑皮层和海马神经细胞的ADAM10免疫染色明显减弱, 而其它细胞如胶质细胞的免疫染色基本一致。总之, 文章成功制备了首个存活至成年的大脑神经细胞特异性ADAM10基因敲除(cKO)小鼠, 克服了小鼠因ADAM10缺失在胚胎期或围产期死亡的弊端, 为研究成年小鼠大脑神经细胞ADAM10基因的功能奠定了坚实的基础。
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| 关 键 词： | ADAM10 条件性基因敲除 转基因小鼠 Western blotting 免疫组化实验 |
| 收稿时间： | 2012-03-26 |
Generation and characterization of the adult neuron-specific ADAM10 knock-out mice |
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| LIU Jun,ZHOU Chang-Wen,WEI Qiu-Lan,ZHUANG Jian-Long,LIN Zhao-Hua,ZHENG Jie-Hui.Generation and characterization of the adult neuron-specific ADAM10 knock-out mice[J].Hereditas,2012,34(12):1570-1576. |
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| Authors: | LIU Jun ZHOU Chang-Wen WEI Qiu-Lan ZHUANG Jian-Long LIN Zhao-Hua ZHENG Jie-Hui |
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| Affiliation: | Department of Cell Biology and Genetics, School of Basic Medicine / Center of Cell and Developmental Biology/ Provincial Key Laboratory of Stem Cell and Regenerative Medicine, Fujian Medical University, Fuzhou 350004, China |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | transgene mice Western blotting immunohistochemistry ADAM10 conditional gene knock-out |
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