自噬在不同分割方案放疗联合化疗中对肺癌细胞的杀伤作用及其机制

目的：通过离体实验、在体实验观察不同放疗方案以及顺铂增敏放疗对肺癌细胞的杀伤效应，探讨自噬在这一过程中发挥的作用及其机制。方法：采用人肺癌细胞A549，以不同浓度(0、1.0、2.5、5.0、10.0、20.0和40.0 μmol?L-1)顺铂进行处理；40只C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=10)、常规分割照射组(n=10)、超分割照射组(n=10)和联合组(n=10)，建立C57BL/6小鼠肺癌异位移植模型。MTT法检测A549细胞存活率，Western blotting法检测各组小鼠自噬相关基因MAPLC3和Beclin1蛋白的表达。采用游标卡尺测量各组小鼠肿瘤体积；免疫组织化学法检测肿瘤组织中自噬相关基因MAPLC3Ⅱ、PI3KⅢ和Beclin1的表达水平。结果： 顺铂药物浓度>5.0 μmol?L-1时A549细胞的存活率呈剂量依赖性下降；与对照组(0 μmol?L-1顺铂)比较，10.0、20.0和40.0 μmol?L-1顺铂组细胞存活率降低（P<0.05）。与对照组比较，其他各组小鼠自噬相关基因MAPLC3Ⅱ和Beclin1蛋白表达水平明显升高；超分割照射组小鼠肿瘤体积<联合组<常规分割照射组<对照组；与对照组比较，其他各组肿瘤体积均减小（P<0.05）。肿瘤组织切片染色，与对照组比较，其他各组自噬相关基因MAPLC3Ⅱ、PI3K-Ⅲ和Beclin1表达水平均明显升高（P<0.05），且在联合组达到最高值。结论：顺铂协同增敏放疗对肺癌细胞的杀伤作用，自噬可能参与其调控。