| 融合蛋白VacA-HpaA卵黄抗体的体外研究 |
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| 引用本文： | 叶翠莲,杨致邦,张吉,黄进.融合蛋白VacA-HpaA卵黄抗体的体外研究[J].中国免疫学杂志,2008,24(2):114-118. |
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| 作者姓名： | 叶翠莲 杨致邦 张吉 黄进 |
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| 作者单位： | 1. 重庆工学院生物工程学院,重庆,400050
2. 重庆医科大学病原生物学教研室,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 目的：研究VacA-HpaA融合蛋白的鸡卵黄抗体（IgY）的理化特性和生物学活性,为制备集预防与治疗为一体的抗H.pylori感染的制剂奠定基础。方法：以纯化的VacA-HpaA融合蛋白免疫产蛋鸡,水稀释法获取蛋黄抗体（VacA-HpaAIgY）。（1）用硫酸铵沉淀法纯化IgY后,用SDS-PAGE分析其纯度,Bradford法测定蛋白含量。（2）用间接ELISA法检测该IgY的耐热性、耐酸性及其对酶消化的耐受作用。（3）采用Western blot分析IgY的特异性并检测其效价。（4）用MTT法检测不同浓度VacA-HpaAIgY对细胞毒活性的中和作用。（5）用扫描电镜观察VacA-HpaA IgY对AGS细胞粘附的中和作用。结果：（1）该IgY纯度为60%,蛋白浓度为22g/L;（2）具有一定的耐热性、耐酸性和耐胃蛋白酶能力;（3）Western blot分析显示IgY的特异性,在相对分子量约27000和30000处出现在相应的条带;（4）该IgY对VacA细胞毒活性有中和作用,且具有量效性和时效性;（5）IgY可阻止H.pylori菌体蛋白的粘附作用。结论：该IgY具有良好的理化和生物学特性,可用于制备抗H.pylori感染的防治制剂。
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| 关 键 词： | 幽门螺杆菌 IgY 细胞空泡毒素 粘附素 体外试验 中和作用 融合蛋白 卵黄抗体 体外研究 Helicobacter pylori protein fusion studies 防治制剂 生物学特性 粘附作用 菌体蛋白 时效性 量效 VacA 相对分子量 显示 能力 胃蛋白酶 蛋白浓度 结果 |
| 文章编号： | 1000-484X（2008）02-0114-05 |
| 收稿时间： | 2006-06-29 |
| 修稿时间： | 2007-03-25 |
In vitro studies of IgY against fusion VacA-HpaA protein of Helicobacter pylori |
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| YE Cui-Lian,YANG Zhi-Bang,ZHANG Ji,HUANG Jin.In vitro studies of IgY against fusion VacA-HpaA protein of Helicobacter pylori[J].Chinese Journal of Immunology,2008,24(2):114-118. |
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| Authors: | YE Cui-Lian YANG Zhi-Bang ZHANG Ji HUANG Jin |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Helicobacter pylori IgY VacA HpaA Vitro Neutralization |
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