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| 重组腺病毒载体携带多药耐药基因1反义RNA靶向逆转肝癌细胞多药耐药 | |
| 引用本文： | 梅英,石毓君,丁雄,简华刚,龚建平,刘长安,陈晓光.重组腺病毒载体携带多药耐药基因1反义RNA靶向逆转肝癌细胞多药耐药[J].中华肝脏病杂志,2009,17(8). |
| 作者姓名： | 梅英 石毓君 丁雄 简华刚 龚建平 刘长安 陈晓光 |
| 作者单位： | 1. 重庆医科大学附属第二医院创伤外科,400010 2. 四川大学华西医院移植工程与移植免疫实验室 3. 重庆医科大学附属第二医院肝胆外科,400010 |
| 基金项目： | 重庆市卫生局重点课题 |
| 摘 要： | 目的 探讨携带多药耐药基因1(multidrug resistance gene 1,mdr1)反义RNA的重组腺病毒载体靶向逆转甲胎蛋白阳性(AFP+)的肝癌多药耐药细胞HepG2R的疗效及作用机制.方法 分别构建携带AFP启动子和mdr1基因反义核苷酸片段的重组腺病毒载体Adeno-asmdr及携带AFP启动子和增强绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒载体Adeno-EGFP,将Adeno-EGFP转染人正常肝细胞L02(AFP-),人官颈癌细胞HeLa(AFP-)及HepG2(AFP+)细胞,检测增强绿色荧光蛋白基因在各细胞的转录水平;将Adeno-asmdr转染HepG2R细胞,Western blot检测不同时间P-gp170的表达,末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法检测HepG2R细胞凋亡,流式细胞术检测HepG2R细胞在不同药物作用下细胞周期、凋亡率.结果 增强绿色荧光蛋白基因在AFP阳性的HepG2细胞可得到显著转录,而在L02细胞和HeLa细胞,其转录减少,显示了该载体的良好转录活性以及靶向特异性.Adeno-asmdr转染HepG2R细胞后,HepG2R细胞P-gp170表达明显减弱,HepG2R细胞凋亡增加,HepG2R细胞对多种化疗药物的耐受能力明显下降,细胞出现显著的周期阻滞,大量细胞被阻滞于S期和G0/M期,凋亡细胞比例增加.结论 实验构建的Adneo-asmdr重组腺病毒载体可在AFP阳性HepG2R细胞内特异靶向性表达目的 基因,并可有效降低mdrl基因产物P-gp170的表达,从而达到对HepG2R细胞多药耐药的逆转作用. |
| 关 键 词： | 癌 肝细胞 腺病毒 反义技术 多药耐药基因1 |
Reversal of multidrug resistance in hepatocellular cell line HepG2R by mdr1-antisense RNA |
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| MEI Ying,SHI Yu-jun,DING Xiong,JIAN Hua-gang,GONG Jian-ping,LIU Chang-an,CHEN Xiao-guang.Reversal of multidrug resistance in hepatocellular cell line HepG2R by mdr1-antisense RNA[J].Chinese Journal of Hepatology,2009,17(8). | |
| Authors: | MEI Ying SHI Yu-jun DING Xiong JIAN Hua-gang GONG Jian-ping LIU Chang-an CHEN Xiao-guang |
| Abstract: | |
| Keywords: | Carcinoma hepatocellular Adenovirus Antisense technology Multidrug resistance gene 1 |
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