重组猪干扰素-α单克隆抗体的制备和鉴定 |
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引用本文: | 周晓丽,袁秀芳,杜晓莉,李军星,徐丽华,王一成.重组猪干扰素-α单克隆抗体的制备和鉴定[J].浙江农业学报,2015(3):332-337. |
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作者姓名: | 周晓丽 袁秀芳 杜晓莉 李军星 徐丽华 王一成 |
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作者单位: | 浙江省农业科学院畜牧兽医研究所;南京农业大学动物医学院;甘肃农业大学动物医学院 |
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基金项目: | 浙江省重大科技专项重点农业项目(2012C12009-1);浙江省“三农六方”科技协作项目(2012R22A60C01) |
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摘 要: | 利用自动发酵罐培养毕赤酵母,甲醇诱导其分泌表达重组猪IFN-α(r Po IFN-α);经硫酸铵沉淀、G-25琼脂糖柱脱盐处理及阴离子交换柱和分子筛层析纯化。以纯化r Po IFN-α蛋白作为抗原免疫6周龄BALB/c鼠3次后,取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,经间接ELISA筛选和3~5次亚克隆,共获得5株均能稳定分泌抗r Po IFN-α单克隆抗体的杂交瘤细胞株。抗体亚类鉴定、特异性和叠加试验结果表明,这5株抗体均属于Ig G1亚类,能与r Po IFN-α产生特异性反应,其抗原结合位点相同或相近。该研究有助于进一步推动r Po IFN-α单克隆抗体在猪免疫学以及猪疫病诊断中的应用。
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关 键 词: | 重组猪IFN-α 单克隆抗体 特异性鉴定 |
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