| 人白细胞介素-10 cDNA的克隆 |
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| 引用本文： | 刘俊杰,陈家存,胡书群,陆梁,裴冬生.人白细胞介素-10 cDNA的克隆[J].徐州医学院学报,2002,22(5):380-382. |
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| 作者姓名： | 刘俊杰 陈家存 胡书群 陆梁 裴冬生 |
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| 作者单位： | 1. 徐州医学院附属医院泌尿外科,江苏,徐州,221002
2. 徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心 |
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| 基金项目： | 江苏省教育厅资助课题 (No.OOKJD32 0 0 0 1) |
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| 摘 要： | 目的：克隆人白细胞介素10(hIL-10)cDNA的全长序列，为其分子生物学利用奠定基础。方法：无菌条件抽取正常成人外周血15ml，分离单核细胞，用刀豆素A(ConA)刺激培养24h；离心得到一定量细胞，加入变性液，一步法提取细胞总RNA；反转录合成IL-10的第1条链，用自己设计的特异性上下游引物进行PCR扩增，得到期望分子量的PCR产物；酶切后插入PcDNA3载体，转染感受态细胞进行筛选制备，并行酶切鉴定和测序。结果：外周血单核细胞经ConA刺激后IL-10转录水平增加，从提取的RNA反转录产物中容易扩增出期望分子量的PCR产物，酶切鉴定证明得到的IL-10cDNA分子量与基因库报告的相近，测序结果表明得到的IL-10cDNA序列与基因库报告的序列完全一致。结论：人的IL-10cDNA全长序列被成功克隆。
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| 关 键 词： | 人白细胞介素－10 cDNA 克隆 |
| 文章编号： | 1000-2065(2002)05-0380-03 |
Molecular cloning of human cytokine synthesis inhibitory factor (IL-10) cDNA |
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| LIU Jun-jie,CHEN Jia-cun,HU Shu-qun,et al.Molecular cloning of human cytokine synthesis inhibitory factor (IL-10) cDNA[J].Acta Academiae Medicinae Xuzhou,2002,22(5):380-382. |
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| Authors: | LIU Jun-jie CHEN Jia-cun HU Shu-qun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | human interleukin-10 cloning |
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