| 原代大鼠胰岛的分离纯化及功能鉴定 |
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| 引用本文： | 李小东,郭庆,高璟英,张婉,武冬梅,刘云峰,章毅.原代大鼠胰岛的分离纯化及功能鉴定[J].中医药研究,2014(3):345-346. |
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| 作者姓名： | 李小东 郭庆 高璟英 张婉 武冬梅 刘云峰 章毅 |
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| 作者单位： | [1]山西医科大学,030001 [2]山西医科大学基础医学院药理教研室,030001 [3]山西医科大学第一医院,030001 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（No.NSFC81070662,81273564）,山西省自然科学基金（No.20120110398）,山西省高等学校优秀青年学术带头人支持计划（No.201124）,山西省留学人员科技活动项目择优资助（No.2011762）,山西省回国留学人员科研资助项目（No.2012046）,山西省卫生厅科研课题（No.201201062）. |
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| 摘 要： | 目的 探讨成年大鼠胰岛分离、纯化的方法,为成人胰岛的分离纯化奠定基础.方法通过用胶原酶P消化胰腺及利用Histopaque 1077分离液离心分离纯化雄性SD大鼠胰岛,用双硫棕（DTZ）染色,吖啶橙-碘化丙啶（AO/PI）染色和胰岛素分泌实验来鉴定胰岛的纯度、活性和功能;利用激光共聚焦技术检测胰岛细胞中钙离子浓度.结果 分离获得的胰岛可被DTZ和AO/PI分别染成猩红色和绿色;体外刺激胰岛素分泌实验,2.8 mM、8.3 mM、16.7mM葡萄糖情况下胰岛素分泌量分别是：（11.7 ± 1.4）uIU/mL、（38.2 ± 8.7）uIU/mL、（86.3 ± 5.1）uIU/mL;在2.8 mM葡萄糖基础上,8.3 mM葡萄糖明显增加胰岛细胞中钙离子浓度,16.7 mM葡萄糖在8.3 mM葡萄糖基础上又进一步升高钙离子浓度.结论采用胶原酶P消化法及Histopaque 1077分离液离心分得的胰岛纯度高,活性、功能良好,随着葡萄糖浓度的增加,胰岛细胞中钙离子浓度明显增加.
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| 关 键 词： | 胰岛 分离 钙离子 原代大鼠 |
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