| 人ERβ AF1融合蛋白的表达及其多克隆抗体制备 |
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| 引用本文： | 袁斌,仇玮祎,李杰之,丁丽华,韩聚强,熊志红,杨智洪,叶棋浓.人ERβ AF1融合蛋白的表达及其多克隆抗体制备[J].细胞与分子免疫学杂志,2008,24(3):247-249. |
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| 作者姓名： | 袁斌 仇玮祎 李杰之 丁丽华 韩聚强 熊志红 杨智洪 叶棋浓 |
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| 作者单位： | 军事医学科学院生物工程研究所,北京,100850 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金
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解放军医药卫生科研项目 |
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| 摘 要： | 目的: 制备雌激素受体β多克隆抗体.方法: 从人乳腺cDNA文库中PCR扩增ERβ AF1结构域(1～144位氨基酸), DNA 重组插入原核表达质粒pGEX-KG, 转化大肠杆菌DH5α, 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达GST-ERβ AF1融合蛋白.纯化后免疫BALB/c小鼠, 制备鼠多抗血清.通过Western blot和免疫组织化学实验鉴定血清特异性和效价.结果: 成功构建了pGEX-KG/ERβ AF1原核表达载体, 转化DH5α后可高效表达融合蛋白GST-ERβ AF1, 免疫产生的ERβ多抗可特异检测ERβ真核表达载体转染人293T细胞及乳腺癌细胞中ERβ的表达.结论: 制备的ER 抗体对ERβ有反应原性, 效价高, 特异性好, 为进一步研究ERβ的生物学功能奠定基础.
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| 关 键 词： | 雌激素受体β 融合蛋白 多克隆抗体 融合蛋白 真核表达载体 多克隆 生物学功能 研究 反应原性 抗体 乳腺癌细胞 转染 特异检测 多抗血清 高效表达 转化 原核表达载体 结果 血清特异性 化学实验 免疫组织 Western blot |
| 文章编号： | 1007-8738(2008)03-0247-03 |
| 修稿时间： | 2007年6月18日 |
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