He-Ne激光对兔眼小梁切除术后滤过道成纤维细胞增殖的影响

目的 研究兔眼小粱切除术前辅助使用He-Ne激光照射滤过区对滤过道成纤维细胞增殖情况的影响.方法 随机选取健康新西兰大白兔29只(58眼)用于实验.实验一:将健康新西兰大白兔8只(16眼)随机分为4组,即100 mW·cm-2、150 mW·cm-2、200 mW·cm-2激光手术组及空白对照组,每组各2只(4眼),激光手术组兔眼使用不同功率密度的He-Ne激光照射,空白对照组兔眼不行激光照射.照射部位选择兔眼鼻上象限角膜缘紧邻上直肌处,照射距离10cm,光斑直径4 mm,照射时间10 min,每天1次,连续照射3d.最后一次照射24h后处死动物,取照射区组织采用病理学和免疫组织化学技术.检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA),并使用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminaldeoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling,TUNEL)观察照射区成纤维细胞增殖和凋亡的病理改变.实验二:将另外21只兔(42眼),采用200 mW·cm-2 He-Ne激光同上法预处理每只兔右眼手术区,最后一次照射24h后实施小梁切除术(即激光联合小粱切除术组),左眼行单纯小粱切除术为单纯手术对照组,分别于手术后7d、14d、28d检测滤过区组织上述指标.结果 实验一:各He-Ne激光联合小梁切除术组与空白对照组均仅检测到少量PCNA阳性细胞,未见明显TUNEL凋亡细胞,差异均无统计学意义(均为P>0.05).实验二:200 mW·cm-2 He-Ne激光联合小梁切除术组与单纯手术对照组PCNA阳性细胞率术后7d最高,14d显著降低,28d降至最低.术后7d、14d,200 mW·cm-2 He-Ne激光联合小梁切除术组PCNA阳性细胞率分别为(19.34±2.35)%、(10.48±3.29)%,均明显低于单纯手术对照组(22.88±3.29)%、(14.35±2.56)%(均为P<0.05);术后28 d,2组PCNA阳性细胞率均较低,差异无统计学意义(p>0.05).2组各时间点亦未检测到明显TUNEL凋亡细胞.结论 He-Ne激光照射对正常兔眼结膜下及巩膜成纤维细胞活性无明显影响,小粱切除术前辅助使用200 mW·cm-2 He-Ne激光照射可以抑制术后早期成纤维细胞增殖,可能有助于抑制滤过泡的瘢痕化而提高手术成功率.

Effect of He-Ne laser on proliferation of fibroblasts in filtering route after trabeculectomy in rabbit eyes