人源TNF-α抗体基因的克隆与表达 |
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引用本文: | 田露芳,赵小玲,张克军,杨志华.人源TNF-α抗体基因的克隆与表达[J].中国医药导报,2009,6(21):9-11. |
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作者姓名: | 田露芳 赵小玲 张克军 杨志华 |
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作者单位: | 1. 山西医科大学第一医院耳鼻喉科,山西太原,030001 2. 军事医学科学院卫生学环境医学研究所应激医学研究室,天津,300050 |
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基金项目: | 国家自然科学基金,天津市科技攻关项目 |
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摘 要: | 目的:在原核系统中高效表达抗TNF-α单克隆抗体VH/K21,以便进一步研究其生物学功能,预测临床应用前景.方法:以已筛选获得的TNF-α抗体基因VH/K21为模板进行PCR扩增,产物与其表达质粒进行双酶切,连接后克隆进入PET22b(+)/BL21(DE3)感受态中并在该原核系统中实现可溶性表达;对表达产物进行Western blotting、ELISA鉴定.结果:成功克隆与表达出可溶性的高效表达的人源TNF-α单克隆抗体.序列分析表明该克隆具有全新的人源TNF-α抗体基因,它可以特异识别人TNF-α.结论:人源TNF-α单克隆抗体的获得为进一步研制应用于临床的TNF-α人源抗体奠定了基础,也将为其他人源抗体的制备提供理论依据和技术基础.
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关 键 词: | 抗体 TNF-α 变应性鼻炎 TNF-α |
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