| LAT基因簇miRNA的CRISPR/Cas9基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响分析 |
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| 引用本文： | 楚钰淑,滕蔓,周子誉,石彬,郑鹿平,刘金玲,罗俊,张改平.LAT基因簇miRNA的CRISPR/Cas9基因编辑对马立克病病毒体外复制的影响分析[J].病毒学报,2021,37(6):1428-1439. |
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| 作者姓名： | 楚钰淑 滕蔓 周子誉 石彬 郑鹿平 刘金玲 罗俊 张改平 |
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| 作者单位： | 河南农业大学生命科学学院,郑州450002;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,农业部动物免疫学重点实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南省农业科学院中英禽病国际研究中心,郑州450002;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,农业部动物免疫学重点实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南省农业科学院中英禽病国际研究中心,郑州450002;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,农业部动物免疫学重点实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;河南省农业科学院中英禽病国际研究中心,郑州450002;河南科技大学动物科技学院,动物疫病与公共卫生重点实验室,洛阳4710036;扬州大学兽医学院,扬州225009;江苏高校动物重要疫病与人兽共患防控协同创新中心,扬州大学,扬州225009;河南农业大学生命科学学院,郑州450002;河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,农业部动物免疫学重点实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;江苏高校动物重要疫病与人兽共患防控协同创新中心,扬州大学,扬州225009 |
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| 摘 要： | 病毒编码的microRNA(miRNA)在马立克病病毒(MDV)的复制、潜伏感染及诱导肿瘤发生中发挥重要的调控功能.血清1型MDV(MDV-1)编码的26个成熟体miRNA在基因组中形成3个基因簇,分别命名为Meq、Mid和LAT miRNA基因簇.本文利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,以超强毒株(vvMDV)国内代表株GX0101为研究对象,设计并合成一系列可实现LAT基因簇miRNA编辑缺失的特异性gRNA组合,成功构建了一株LAT基因簇miRNA缺失毒株GX△LAT-miRs-C21-15.经DNA测序分析、IFA鉴定及RT-qPCR分析,证实LAT基因簇miRNA被完全编辑缺失.该基因缺失毒株传代稳定性良好,miRNA的缺失不影响MDV的体外复制及相关基因表达.本研究基于CRISPR/Cas9系统,获得了稳定的LAT基因簇miRNA编辑缺失毒株,为后续相关miRNA的功能研究奠定了重要基础.
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| 关 键 词： | MDV CRISPR/Cas9 基因编辑 miRNAs LAT基因簇 调控功能 |
CRISPR/Cas9 System-based Gene Editing of the LAT-clustered MicroRNAs and Its Influence on in vitro Replication of Marek's Disease Virus |
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| CHU Yushu,TENG Man,ZHOU Ziyu,SHI Bin,ZHENG Luping,LIU Jinling,LUO Jun,ZHANG Gaiping.CRISPR/Cas9 System-based Gene Editing of the LAT-clustered MicroRNAs and Its Influence on in vitro Replication of Marek's Disease Virus[J].Chinese Journal of Virology,2021,37(6):1428-1439. |
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| Authors: | CHU Yushu TENG Man ZHOU Ziyu SHI Bin ZHENG Luping LIU Jinling LUO Jun ZHANG Gaiping |
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