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白细胞介素-21对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响
引用本文:张颖健,李常虹,邢瑞,孙琳,赵金霞,刘湘源.白细胞介素-21对RAW264.7细胞向破骨细胞分化的影响[J].中国骨质疏松杂志,2015(3):253-258.
作者姓名:张颖健  李常虹  邢瑞  孙琳  赵金霞  刘湘源
作者单位:北京大学第三医院风湿免疫科,北京100191(第一作者现工作单位为北京市公安局强制治疗管理处)
基金项目:国家自然科学基金青年基金项目(81102255 )
摘    要:目的 了解白细胞介素-21 (IL-21)诱导小鼠巨噬细胞系RAW264.7细胞向破骨细胞分化的作用,并探讨其可能的机制。方法1、以不同浓度IL-21(0,1,10,20,40 ng/ml)处理RAW264. 7细胞,培养5天后进行抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色,Western Blot和免疫组化法检测降钙素受体(CTR)表达,采用Real time PCR法检测CTR和组织蛋白酶(Cathepsin)-K的 mRNA表达水平。2、以信号通路抑制剂AG490、LY294002和PD98059作用30min后再加人IL-21,培养5天后观察破骨细胞形成情况,以Western Blot检测IL-21作用不同时间点时信号通路分子总蛋白和磷酸化蛋白水平,探讨IL-21直接诱导破骨细胞分化的作用机制。结果1、在无RANKL作用的情况下,随着IL-21浓度增加TRAP阳性细胞数逐渐增多,20 ng/ml作用最强,40ng/ml时减弱。IL-21能够诱导破骨标志分子CTR和Cathepsin-K mRNA水平表达上调。Western Blot和免疫细胞化学证实,与阴性组比较,IL-21能促进CTR蛋白水平表达增高。2、PI3K-AKT通路抑制剂(LY294002)可以显著抑制IL-21诱导的 RAW264. 7细胞向破骨细胞分化,IL-21刺激5 ~ 15 min时p-AKT表达增强。结论 IL-21可不依赖RANKL直接诱导小鼠巨噬细胞系RAW264. 7细胞向破骨细胞分化,该作用可能由PI3K-AKT通路介导。

关 键 词:白细胞介素-21  破骨细胞  RAW264.  7

Effect of interleukin-21 on osteoclastogenesis in RAW264. 7 cells
ZHANG Yingjian,LI Changhong,XING Rui,SUN Lin,ZHAO Jinxi,LIU Xiangyuan.Effect of interleukin-21 on osteoclastogenesis in RAW264. 7 cells[J].Chinese Journal of Osteoporosis,2015(3):253-258.
Authors:ZHANG Yingjian  LI Changhong  XING Rui  SUN Lin  ZHAO Jinxi  LIU Xiangyuan
Abstract:
Keywords:Interleukin-21  Osteoclast  RAW264  7
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