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| 转基因内皮细胞的构建及其在复合血管上种植的初步研究 | |
| 引用本文： | 顾兴华,贾剑国,汪洋,毛红霞,宿燕岗,左伋,孙爱军,张红旗,徐丹令,邹云增,王克强,葛均波.转基因内皮细胞的构建及其在复合血管上种植的初步研究[J].中国生物医学工程学报,2006,25(2):133-141. |
| 作者姓名： | 顾兴华 贾剑国 汪洋 毛红霞 宿燕岗 左伋 孙爱军 张红旗 徐丹令 邹云增 王克强 葛均波 |
| 作者单位： | 1. 复旦大学附属中山医院,上海 200032 2. 复旦大学上海医学院,上海 200032 3. Lerner ResearchInstitute,Cleveland,Ohio 44195,USA. |
| 基金项目： | 中国科学院资助项目;国家科技攻关项目 |
| 摘 要： | 目的:为了解决小口径(直径7mm以下)人造血管术后通畅率低下的问题,利用生物-人工复合血管,结合分子生物学手段,将转入血管内皮生长因子(VEGF165)基因的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)种植于复合血管内腔面,为解决此临床难题提供新的思路和手段。材料方法:构建VEGF165真核表达质粒pCI-neo-VEGF165,获得正确的质粒用于转染HUVEC。从中科院购买HUVEC(代号:ECV-304),用脂质体介导法将pCI-neo-VEGF165转入细胞,经G418筛选后,计数阳性克隆,以比较脂质体和质粒在不同比例情况下转染效率的高低。实验组按质粒和脂质体比例的不同分为4组:1μg/3μl;2μg/6μl;2μg/8μl;3μg/12μl。ELISA检测瞬时转染后HUVEC培养上清中VEGF的表达。再将VEGF165基因瞬时转入HUVEC,利用自己设计的旋转培养装置,将细胞均匀地粘附、种植于复合血管内腔面。复合血管是人工材料(聚酯)和生物材料(成纤维细胞长入,胶原形成)有机结合而成,是将包有聚酯网的硅胶棒埋入绵羊背部皮下组织,3个月后取出,抽去硅胶棒而得到的。结果:脂质体转染效率以2μg/8μl组阳性克隆数最多;ELISA测定瞬时转染后HUVEC培养上清中VEGF的表达量为532·5±43·1pg/ml。使用旋转培养装置的细胞均匀地粘附于复合血管,未使用者细胞积聚于血管腔面下部;转入和未转入VEGF165基因的HUVEC在复合血管内腔面覆盖面积百分比分别为69·9%±3·5%、43·7%±2·5%,有明显改善。结论:转入VEGF后可促进HUVEC在复合血管上生长,旋转培养装置有利于细胞的均匀粘附。 |
| 关 键 词： | 血管内皮生长因子 人脐静脉内皮细胞 转染 复合血管 |
| 文章编号： | 0258-8021（2006）02-0133-09 |
| 收稿时间： | 2005-03-14 |
| 修稿时间： | 2006-02-20 |
The Construction of VEGF Transferred HUVEC and Seeding on the Luminal Surface of Biosynthetic Vascular Grafts |
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| GU Xing-Hua,JIA Jian-Guo,WANG Yang,MAO Hong-Xia,SU Yan-Gang,ZUO Ji,SUN Ai-Jun,ZHANG Hong-Qi,XU Dan-Ling,ZHOU Yun-Zeng,WANG Ke-Qiang,GE Jun-Bo.The Construction of VEGF Transferred HUVEC and Seeding on the Luminal Surface of Biosynthetic Vascular Grafts[J].Chinese Journal of Biomedical Engineering,2006,25(2):133-141. | |
| Authors: | GU Xing-Hua JIA Jian-Guo WANG Yang MAO Hong-Xia SU Yan-Gang ZUO Ji SUN Ai-Jun ZHANG Hong-Qi XU Dan-Ling ZHOU Yun-Zeng WANG Ke-Qiang GE Jun-Bo |
| Abstract: | |
| Keywords: | Vascular Endothelial Growth Factor Human Umbilical Vein Endothelial cells Transfer Biosynthetic vascular graft |
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