miR-125a下调Notch1参与调控心肌梗死后心肌纤维化

目的探究微小RNA-125a（MicroRNA-125a, miR-125a）在心肌梗死（Myocardial Infarction，MI）后心肌纤维化（Myocardial Fibrosis，MF）中的作用及对Notch1及其相关蛋白表达的影响。方法整理分析120位MI后非MF患者和115位MI后MF患者一般临床资料及心电图特征；Masson染色观察各心脏重构病变；光学比色法检测羟脯氨酸含量；免疫荧光和免疫组化技术检测MI后MF病变组织α-平滑肌肌动蛋白（α-Smooth Muscle Actin，α-SMA）和Ⅰ型胶原蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链反应（Quantitative Real Time-Polymerase Chain Reaction,qRT-PCR）法检测患者组织与外周血miR-125a含量；qRT-PCR和Western Blot检测miR-125a抑制剂对人原代心脏成纤维细胞miR-125a和Notch1表达的影响；细胞计数盒（Cell Counting Kit-8，CCK-8）法检测人原代心脏成纤维细胞增殖率；Annexin Ⅴ/碘化丙啶（Propidium Iodide，PI）双标法和DAPI染色法检测细胞凋亡；Western Blot检测Notch1、p-Smad2/3、Smad2/3、α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白表达。结果MI后MF患者与MI后非MF患者相比，外周血和组织中miR-125a含量显著升高；显著升高的miR-125a含量与左心室收缩压、收缩末期容积、舒张末期容积、射血分数、羟脯氨酸、α-SMA和Ⅰ型胶原含量显著正相关，与左心室舒张压呈显著负相关；miR-125a抑制剂可剂量依赖性（20~100 μmol/L）上调Notch1蛋白表达；40 μmol/L的miR-125a抑制剂可时间依赖性(24~72 h)抑制细胞增殖；40 μmol/L的miR-125a抑制剂组细胞在24 h时核固缩和Annexin Ⅴ+PI-细胞比例明显高于40 μmol/L miR-NC的对照组水平；40 μmol/L的miR-125a抑制剂可显著上调转化生长因子-β1介导的Notch1蛋白的下调，p-Smad2/3、α-SMA和Ⅰ型胶原蛋白的上调。结论高表达的miR-125a与MI后MF心功能显著相关，且其下调通过上调Notch1蛋白并抑制p-Smad2/3引起心脏成纤维细胞凋亡并抑制细胞增殖。

miR-125a down-regulates Notch1 to mediate myocardial fibrosis after myocardial infarction