| Nrdp1 siRNA重组腺病毒载体的构建及其对心肌肥大的影响 |
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| 引用本文： | 张 圆,韩丽莎,胡 海,张 坤,王艳国,刘 佳,牛常存.Nrdp1 siRNA重组腺病毒载体的构建及其对心肌肥大的影响[J].中国动脉硬化杂志,2015,23(4):352-356. |
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| 作者姓名： | 张 圆 韩丽莎 胡 海 张 坤 王艳国 刘 佳 牛常存 |
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| 作者单位： | 1. 包头医学院病理生理学教研室,内蒙古包头市,014060
2. 包头医学院第一附属医院神经外科,内蒙古包头市,014010 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助（81200124）；内蒙古自治区自然科学基金资助（2012MS1107）；内蒙古自治区高等学校青年科技英才支持计划资助（NJYT-13-B19） |
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| 摘 要： | 目的构建及鉴定神经调节素受体蛋白1(Nrdp1)基因siRNA重组腺病毒载体,初步研究Nrdp1基因对心肌细胞肥大的影响。方法设计并合成Nrdp1的siRNA靶向DNA序列,克隆至穿梭载体GV119中,并与腺病毒骨架质粒Ad Max在BJ5183细菌中进行同源重组,转染HEK293细胞,包装得到含si Nrdp1的重组腺病毒,实时定量PCR及Western blot检测重组腺病毒对新生大鼠原代心肌细胞Nrdp1表达的影响。然后利用血管紧张素Ⅱ和沉默Nrdp1的腺病毒干预体外培养的新生大鼠原代心肌细胞,实时定量PCR检测心肌肥大标志基因(ANF、β-MHC、Skeletal-α-actin)的表达。结果酶切后PCR分析、测序鉴定表明,干扰Nrdp1腺病毒构建成功,病毒纯化后滴度为1.5E+9 PFU/m L;重组干扰Nrdp1腺病毒可在蛋白水平和mRNA水平明显抑制Nrdp1的表达(P0.001);沉默Nrdp1基因后,可明显上调血管紧张素Ⅱ诱导的心肌细胞肥大标志基因ANF、β-MHC和Skeletal-α-actin的表达(P0.01)。结论构建的Nrdp1 siRNA重组腺病毒能有效地抑制新生大鼠原代心肌细胞中Nrdp1表达,且Nrdp1基因沉默后可加重AngⅡ诱导的心肌细胞肥大。
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| 关 键 词： | Nrdp1基因 小干扰RNA 腺病毒载体 心肌肥大 |
| 收稿时间： | 2014/7/15 0:00:00 |
Construction of Recombinant Adenovirus Vector of Nrdp1 siRNA and Its Effect of Promoting Cardiomyocyte Hypertrophy |
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| ZHANG Yuan,HAN Li-Sh,HU Hai,ZHANG Kun,WANG Yan-Guo,LIU Ji,and NIU Chang-Cun.Construction of Recombinant Adenovirus Vector of Nrdp1 siRNA and Its Effect of Promoting Cardiomyocyte Hypertrophy[J].Chinese Journal of Arteriosclerosis,2015,23(4):352-356. |
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| Authors: | ZHANG Yuan HAN Li-Sh HU Hai ZHANG Kun WANG Yan-Guo LIU Ji and NIU Chang-Cun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | Nrdp1 Gene siRNA Adenovirus Vector Cardiomyocyte Hypertrophy |
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