| 人Ism1表达载体的构建及其在293T细胞的表达 |
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| 引用本文： | 孙雪荣,邓韵婷,崔红晶,郑慧玲,薛传静,荆霞,刘新光.人Ism1表达载体的构建及其在293T细胞的表达[J].牡丹江医学院学报,2013(4):28-30. |
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| 作者姓名： | 孙雪荣 邓韵婷 崔红晶 郑慧玲 薛传静 荆霞 刘新光 |
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| 作者单位： | [1]广东省医学分子诊断重点实验室,广东东莞523808 [2]广东医学院衰老研究所,广东东莞523808 [3]广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江524023 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金（81170327）;广东省医学科研基金项目（A2012420）;广东医学院科技创新基金（STIF201102）.广东医学院博士启动基金（B2011005）资助. |
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| 摘 要： | 目的:构建人Ism1基因真核表达载体,并验证其在真核细胞中的表达,为相关研究奠定基础。方法:采用高保真DNA聚合酶和GC缓冲液从A549细胞扩增获取人Ism1编码序列全长,经酶切、连接、转化后,挑取阳性克隆进行菌液PCR、双酶切,及测序鉴定;用构建成功的Ism1表达载体转染293T细胞,用实时定量RT-PCR检测Ism1表达水平。结果:构建的Ism1载体经菌液PCR,双酶切鉴定后,测序结果完全正确,载体转入293T细胞后,Ism1表达量显著上升。结论:成功构建能在真核细胞中表达的人Ism1基因载体,将为相关研究提供便利。
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| 关 键 词： | Ism1 表达载体 基因重组 293T细胞 |
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