丹参酮ⅡA对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤磷酸化NMDA受体1表达及细胞内游离钙浓度的影响

目的：观察丹参酮ⅡA（TanⅡA）对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）脑皮质神经细胞S897位点磷酸化的NMDA受体-1亚基（phospho-NR1 S897）表达以及细胞内游离钙离子浓度（Ca^2＋]i）的影响,探讨TanⅡA对HIBD的保护作用机制。方法：7日龄新生SD大鼠240只随机分为正常对照组、HIBD组及HIBD＋TanⅡA组,按Rice-Vannucci方法制作HIBD动物模型,时间点选择HIDB后3,6,12和24 h（各组各时间点n=10）。TanⅡA按1μg/g每12 h腹腔注射1次。应用Fura-2 AM标记和日立F-4500型荧光扫描仪测定Ca^2＋]i。应用免疫荧光组化染色方法测定phospho-NR1 S897的表达。结果：（1）与正常对照组比较,HIBD组损伤侧脑细胞Ca^2＋]i绝对值和损伤侧与对侧的Ca^2＋]i比值明显升高,各时间点的差异均具有统计学意义（P〈0.05）;与HIBD组比较,HIBD＋TanⅡA组各时间点的Ca^2＋]i升高的程度均有所减轻,其中24 h损伤侧与对侧的Ca^2＋]i比值较HIBD组降低24.9%,差异具有统计学意义（P〈0.05）。（2）正常对照组大脑皮质有大量均匀分布的phospho-NR1 S897染色阳性细胞。与正常对照组比较,HIBD组各时间点损伤侧脑皮质区phospho-NR1 S897阳性表达细胞数和绿色荧光强度均明显降低,差异均具有统计学意义（P〈0.05）。与HIBD组比较,HIBD＋TanⅡA组各时间点的损伤侧脑皮质区phospho-NR1 S897阳性表达细胞数和绿色荧光强度均升高,其中HIBD后3 h和24 h的差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论：TanⅡA可以减轻HIBD导致的脑皮质区phospho-NR1 S897表达减弱的程度,并降低HIBD导致的Ca^2＋]i升高的程度,提示TanⅡA对脑细胞的保护作用可能是通过影响NMDA受体的表达,减少细胞内游离钙聚集而达到的。