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乙型肝炎病毒截短C基因与前S1基因在大肠杆菌中的融合表达及纯化
引用本文:胡兴斌,尹文,韦三华,雷迎峰,吕欣,孙梦宁,杨敬,徐志凯.乙型肝炎病毒截短C基因与前S1基因在大肠杆菌中的融合表达及纯化[J].第四军医大学学报,2006,27(1):49-52.
作者姓名:胡兴斌  尹文  韦三华  雷迎峰  吕欣  孙梦宁  杨敬  徐志凯
作者单位:第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033;第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西,西安,710033
摘    要:目的:构建乙型肝炎病毒(HBV)截短C基因和前S1基因重组原核表达质粒,获得融合蛋白的表达并进行抗原性分析.方法:PCR扩增获得截短C基因片段和前S1基因,双酶切后克隆至原核表达质粒pET28a,转化E.coli DH5α,酶切鉴定得阳性重组质粒pET28a并测序;然后转化E.coli B121,IPTG诱导融合蛋白表达,薄层扫描分析表达蛋白组成;可溶性分析后用Ni^2+ -NTA凝胶亲和层析柱纯化、透析并浓缩融合蛋白,Westem Blot分析特异性和抗原性.结果:成功构建了HBV截短C基因和前S1基因融合的原核表达质粒pET28a—Ct—preS1,目的基因可高效表达,表达产物主要以包涵体形式存在,Ni^2+ -NTA纯化可获得目的蛋白,纯化蛋白具有良好的抗原性和特异性.结论:HBV截短HBcAg和preS1抗原融合蛋白可高效表达并得到纯化,为研究新型乙肝疫苗奠定了基础.

关 键 词:乙型肝炎病毒  融合蛋白  原核表达  疫苗
文章编号:1000-2790(2006)01-0049-04
收稿时间:2005-06-01
修稿时间:2005-06-22

Expression and purification of truncated C gene combined with preS1 gene from HBV in E.coli
HU Xing-Bin,YIN Wen,WEI San-Hua,LEI Ying-Feng,L Xin,SUN Meng-Ning,YANG Jing,XU Zhi-Kai.Expression and purification of truncated C gene combined with preS1 gene from HBV in E.coli[J].Journal of the Fourth Military Medical University,2006,27(1):49-52.
Authors:HU Xing-Bin  YIN Wen  WEI San-Hua  LEI Ying-Feng  L Xin  SUN Meng-Ning  YANG Jing  XU Zhi-Kai
Affiliation:HU Xing-Bin,YIN Wen,WEI San-Hua,LEI Ying-Feng,L(U) Xin,SUN Meng-Ning,YANG Jing,XU Zhi-Kai
Abstract:
Keywords:hepatitis B virus  fused protein  prokaryotic expression  vaccine
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