骨保护素体外抑制小鼠单核巨噬细胞 成熟分化的实验研究

目的研究骨保护素（Osteoprotegerin, 0PG)抑制核因子NF-KB受体活化因子配体（Receptor activator of nuclear kappa B ligand，RANKL)诱导小鼠单核细胞RAW264. 7成熟分化而导致的溶骨效 应。方法50 ng/mL RANKL诱导RAW264. 7细胞1 d后，加人100 ng/mL 0PG(实验组，即0PG + RANKL组）或不加人0PG(对照组，即RANKL组）分别培养7 d和9 d，经细胞形态学观察其变化，抗 酒石酸酸性碟酸酶（Tartrate resistant acid phosphatase, TRAP)染色法观察TRAP阳性多核细胞，扫描 电镜下观察在骨片上的破骨细胞所致的骨吸收陷窝形成情况。结果对照组培养7 d时，在倒置相 差显微镜、透射电镜、光镜下可见细胞形状为椭圆形或不规则形，胞体明显较KAW264.7细胞增大， 胞核多为6 ~ 10个，扫描电镜下还可见大量伪足形成，而实验组培养7 d后，细胞形状多为圆形，且扫 描电镜下未见明显伪足形成；对照组9 d时可见大量TRAP染色阳性的多核巨细胞（含3个或3个以 上的细胞核），而实验组中TRAP染色阳性的多核破骨细胞偶见多核巨细胞，培养9 d时很难找到多 核巨细胞；仅用RANKL诱导RAW264.7细胞分化7 d时，对照组中破骨细胞表面可见大量伪足伸出， 并形成明显的骨吸收陷窝，实验组中破骨细胞见少许伪足突出，不能看到明显的骨陷窝形成。结论 单用50 ng/mL RANKL体外连续诱导RAWM4.7细胞7 d时，可以促进成熟的破骨细胞显著分化。 100 ng/mL 0PG培养9 d能有效地抑制破骨细胞的分化，减少破骨细胞的骨吸收效应。

Study on osteoprotegerin in inhibitation of mouse osteoclast precursor cell differentiation