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等位基因特异性PCR法快速检测结核分枝杆菌常见耐药突变基因
引用本文:彭婉婵,刘文恩,谭耀驹,胡可,蔡杏珊,胡族琼,李艳冰.等位基因特异性PCR法快速检测结核分枝杆菌常见耐药突变基因[J].临床检验杂志,2013,31(4):249-252.
作者姓名:彭婉婵  刘文恩  谭耀驹  胡可  蔡杏珊  胡族琼  李艳冰
作者单位:中南大学湘雅医院检验科,长沙 410008;中南大学湘雅医院检验科,长沙 410008;广州市胸科医院检验科,广州 510095;中南大学湘雅医院检验科,长沙 410008;广州市胸科医院检验科,广州 510095;中南大学湘雅医院检验科,长沙 410008;中南大学湘雅医院检验科,长沙 410008
摘    要:摘要:目的:建立一套同步检测结核分枝杆菌(MTB)常见耐药突变基因的等位基因特异性PCR(AS-PCR)检测体系,以间接判断对利福平(RFP)与异烟肼(INH)的耐药性。 方法:用AS-PCR技术同步检测58株MTB临床分离株rpoB基因516位、526位和531位,katG基因315位及inhA基因-15位密码子突变,并与DNA测序结果进行比对。 结果:AS-PCR法对RFP耐药株检出率为95.1%(39/41),其中rpoB基因531位、526位、516位点突变分别检出28株、10株、2株,包括531位与526位联合点突变1株;未检出突变的2株RFP耐药株经测序验证1株未发生突变、1株发生533位点突变;RFP敏感株均未检测到突变。AS-PCR法对INH耐药株检出率为86.5%(45/52),其中katG基因315位点突变43株、inhA基因-15位点突变2株,未检出突变的7株INH耐药株经测序验证未见突变;INH敏感株均未检测到突变。 结论:等位基因特异性PCR能够快速检测MTB常见突变基因,具有较高的敏感性与特异性,快速经济、操作简便。

关 键 词:结核分枝杆菌  rpoB基因  katG基因  inhA基因  等位基因特异性扩增
收稿时间:2013/2/28 0:00:00

Allele specific PCR for rapid detection of common gene mutations associated with the resistance of Mycobacterium tuberculosis
Abstract:
Keywords:Mycobacterium tuberculosis  rpoB gene  katG gene  inhA genes  allele specific PCR
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