| 具有靶向免疫抑制作用新型重组融合蛋白B7-2-PE40KDEL真核表达载体的构建及其生物效应 |
| |
| 引用本文： | 薛红,骆媛,薛霞,宋新强,梁飞,奚永志.具有靶向免疫抑制作用新型重组融合蛋白B7-2-PE40KDEL真核表达载体的构建及其生物效应[J].军事医学科学院院刊,2007,31(6):509-512. |
| |
| 作者姓名： | 薛红 骆媛 薛霞 宋新强 梁飞 奚永志 |
| |
| 作者单位： | 军事医学科学院附属医院免疫学研究室暨国家生物医学分析中心免疫学研究室,北京,100071 |
| |
| 摘 要： | 目的:构建B7-2-PE40KDEL的真核表达载体,探讨通过体内表达重组融合蛋白,特异性杀伤高表达CD28 T细胞,阻断B7∶CD28/CTLA4共刺激信号途径诱导免疫耐受的可能性.方法:以原核表达载体pRSETA-B7-2-PE40KDEL质粒为模板,采用PCR及酶切连接的方法构建真核表达载体pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL.利用RT-PCR、Western 印迹及ELISA法从mRNA、蛋白质水平检测了B7-2-PE40KDEL在RPE-CHO真核细胞中的表达情况.采用MTT法对其特异性杀伤高表达CD28 T细胞的生物活性进行测定.结果:成功构建了pcDNA3.1/Zeo( )-B7-2-PE40KDEL真核表达载体,转染入RPE-CHO细胞后可转录翻译为重组融合毒素蛋白,相对分子质量约为71×103,平均106个转染细胞24 h表达0.23 μg/L.活性测定显示真核载体所表达的B7-2-PE40KDEL可特异性地抑制高表达CD28的人T淋巴细胞系,而对CD28阴性的人白血病细胞系的抑制率较低.结论:真核载体表达的B7-2-PE40KDEL具有良好的靶向性免疫抑制活性,为进一步开展其体内特异性防治移植排斥反应及自身免疫性疾病奠定了基础.
|
| 关 键 词： | 重组外毒素融合蛋白 B7-2-PE40KDEL 真核表达载体 免疫耐受 靶向性 免疫抑制作用 重组融合蛋白 真核载体 表达载体的构建 生物效应 effect suppression recombinant protein novel eukaryotic expression vector 免疫性疾病 移植排斥反应 防治 内特 免疫抑制活性 载体表达 抑制率 人白血病 阴性 |
| 文章编号： | 1000-5501（2007）06-0509-04 |
| 收稿时间： | 2007-10-17 |
| 修稿时间： | 2007年10月17 |
Construction of eukaryotic expression vector of a novel recombinant protein B7-2-PE40KDEL having immunological suppression effect |
| |
| XUE Hong,LUO Yuan,XUE Xia,SONG Xin-Qiang,LIANG Fei,XI Yong-Zhi.Construction of eukaryotic expression vector of a novel recombinant protein B7-2-PE40KDEL having immunological suppression effect[J].Bulletin of the Academy of Military Medical Sciences,2007,31(6):509-512. |
| |
| Authors: | XUE Hong LUO Yuan XUE Xia SONG Xin-Qiang LIANG Fei XI Yong-Zhi |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | recombinant exotoxin fusion protein B7-2-PE40KDEL eukaryotic expression vector immune tolerance |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
